鸡马立克氏病监测技术的研究及应用

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通过对商用CVI988疫苗细胞培养上清液浓缩与检测,鉴别出了其分泌性抗原成分,且琼扩滴度可达到1:4,而用该疫苗分别免疫SPF鸡和罗曼鸡后,在免疫后第3~8周内均未检测到特异性羽囊病毒沉淀抗原,但该羽囊浸提液经15~20倍浓缩后再测,则在免疫后第3~4周。SPF鸡和罗曼鸡都呈阳性,其后则迅速减小。在对商品CVI988疫苗和HVT(Fc-126)疫苗免疫及其免疫强毒感染的SPF鸡,分别进行羽囊病毒沉淀抗原和血清病毒沉淀抗体的检测。结果显示,单纯免疫鸡群均呈阴性;CVI988免疫接毒后的第一周即可检出羽囊病毒沉淀抗原,较HVT免疫接毒组早2周;而循环沉淀抗体的出现,却较HVT免疫接毒组迟2周,与同期攻毒对照组沉淀抗体的检出时间相当。此外,接毒后的第7~18d,尤其是9~18d,在接毒对照组的血清中发现有MDV沉淀抗原。我们对上述的检出现象分别进行了初步分析和较合理的解释。应用该MDV抗原和抗体同步琼扩检测法,对以安徽省为主的29个的县市部分饲养鸡群随机进行了MD污染状况的调查。结果表明,在调查的8个品种(系)、日龄幅度为31~434d的93个不同免疫状况饲养群中,呈检测阳性的为76个群,总阳性率为81.7%(76/93)。在有效检测报告为阳性的1386只(总计2071)鸡中,则MDV琼扩抗原和抗体的检出阳性率分别为34.1%(472/1386)和64.7%(866/1386),剔除其中的抗原和抗体阳性重叠部分(>115只),MD污染鸡群琼扩法总检出阳性率达88.3%(1223/1386)。此结果与已报道的MDV分子生物学检测方法在其它地区的调查结果有较好的符合率。 由此并综合我们以往的研究结果,进而得出以下结论:疫苗CVI988和HVT的免疫鸡,虽然都含有不能为常规AGP法直接检测到的阶段性且低水平的羽囊MDV抗原,但并不影响羽囊病毒抗原经典AGP法对鸡群MDV强毒感染的特异性诊断;单纯疫苗CVI988和HVT的免疫抗体可能是低水平的,故亦不能被敏感性较低的经典AGP法所检出;在感染鸡的羽毛囊中所发现的MDV抗体,且其消长与血液中的病毒抗体消长呈正相关;而与羽囊病毒抗原消长呈负相关。MDV琼扩抗体与琼扩抗原一样,都是鸡只MDV强毒感染的特异性指征;该抗原和抗体的同步琼扩检测法对MDV强毒污染的检测,不仅简便、快捷、特异,而且重复性好、准确率高,可作为MDV强毒感染诊断的标准技术与方法。
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