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本研究分为二部分，第一部分:左旋多巴诱发6-羟基多巴帕金森病大鼠异动症模型的建立及行为学评价
目的:应用左旋多巴(L-DOPA)建立PD大鼠异动症模型,对其行为学进行评价。
方法:对25只SD大鼠右内侧前脑束注射6-羟基多巴(6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型。2周后进行颈部皮下注射阿朴吗啡诱发转数试验,≥7r/min者为成功PD大鼠模型。将成功PD大鼠模型随机分成两组:分别予生理盐水(Ns)和L-DOPA(L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼)腹腔注射2次/日,共治疗21天,在治疗第2、9、11、18和21天进行前肢功能测定、异常不自主运动(abnormal involuntary movement,AIM评分和旋转反应时间测定。
结果:20只成功PD大鼠模型,10只给以NS治疗,10只给以L-DOPA治疗。NS组治疗前后前肢跨步数无差异,治疗期间始终未出现AIM；L-DOPA治疗后前肢跨步数较治疗前显著增加(P＜0.01),8只出现程度不同的AIM表现,并随治疗时间的延长,AIM评分逐渐升高,第21天AIM总分较第2天增加(P＜0.05),旋转反应时间随治疗时间延长而缩短,第18、21天和第2天相比显著缩短(P＜0.05)。
结论:L-DOPA诱发6-OHDA的PD大鼠AIM和PD患者服用美多巴出现的异动症某些方面相似,为研究异动症提供理想模型。
第二部分:CSC对左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症行为、纹状体A2A受体和mGluR5蛋白表达的影响
目的:评价腺苷A2A受体拮抗剂8-(3-Chlorostyryl)caffeine(CSC)对左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症的行为、纹状体A2A受体和mGluR5蛋白表达的影响。
方法:6-羟基多巴(6-OHDA)立体定向注射至大鼠右前脑内侧束建立单侧毁损帕金森病(PD)大鼠模型。2周后进行颈部皮下注射阿朴吗啡诱发转数试验,≥7r/min者为成功PD大鼠模型。模型成功大鼠随机分为四组:分别给予生理盐水；L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼；CSC2.5mg/kg；CSC2.5mg/kg联合L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼,以腹腔注射为给药方式,每天注射2次,持续21天。予行为学观察评分,采用Western blot检测纹状体区腺苷A2A受体和亲代谢型谷氨酸mGluR5的表达情况。
结果:
1.A2A受体拮抗剂治疗可以减轻PD运动症状,在21天治疗时间内未出现药物耐受。
2.CSC联合L-DOPA治疗可以增强其抗PD作用,同时部分减轻肢体、口颌AIM,缓解旋转反应时间的缩短。
3.单独CSC治疗在改善PD大鼠运动症状同时并不出现异常、过度运动。
4.A2A受体拮抗剂可以降低L-DOPA治疗诱发的AEA受体、mGluR5蛋白表达的上调。
结论:
1.A2A受体参与了帕金森病LID的发生,A2A受体拮抗剂可以降低L-DOPA治疗诱发的A2A受体蛋白表达的上调,改善PD症状,延缓L,ID出现,有望成为有前景的抗PD药物。
2.A2A受体拮抗剂的应用影响帕金森病LID大鼠纹状体mGluR5蛋白表达,提示mGluR5可能是帕金森病潜在治疗靶点。
目的:应用左旋多巴(L-DOPA)建立PD大鼠异动症模型,对其行为学进行评价。
方法:对25只SD大鼠右内侧前脑束注射6-羟基多巴(6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型。2周后进行颈部皮下注射阿朴吗啡诱发转数试验,≥7r/min者为成功PD大鼠模型。将成功PD大鼠模型随机分成两组:分别予生理盐水(Ns)和L-DOPA(L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼)腹腔注射2次/日,共治疗21天,在治疗第2、9、11、18和21天进行前肢功能测定、异常不自主运动(abnormal involuntary movement,AIM评分和旋转反应时间测定。
结果:20只成功PD大鼠模型,10只给以NS治疗,10只给以L-DOPA治疗。NS组治疗前后前肢跨步数无差异,治疗期间始终未出现AIM；L-DOPA治疗后前肢跨步数较治疗前显著增加(P＜0.01),8只出现程度不同的AIM表现,并随治疗时间的延长,AIM评分逐渐升高,第21天AIM总分较第2天增加(P＜0.05),旋转反应时间随治疗时间延长而缩短,第18、21天和第2天相比显著缩短(P＜0.05)。
结论:L-DOPA诱发6-OHDA的PD大鼠AIM和PD患者服用美多巴出现的异动症某些方面相似,为研究异动症提供理想模型。
第二部分:CSC对左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症行为、纹状体A2A受体和mGluR5蛋白表达的影响
目的:评价腺苷A2A受体拮抗剂8-(3-Chlorostyryl)caffeine(CSC)对左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症的行为、纹状体A2A受体和mGluR5蛋白表达的影响。
方法:6-羟基多巴(6-OHDA)立体定向注射至大鼠右前脑内侧束建立单侧毁损帕金森病(PD)大鼠模型。2周后进行颈部皮下注射阿朴吗啡诱发转数试验,≥7r/min者为成功PD大鼠模型。模型成功大鼠随机分为四组:分别给予生理盐水；L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼；CSC2.5mg/kg；CSC2.5mg/kg联合L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼,以腹腔注射为给药方式,每天注射2次,持续21天。予行为学观察评分,采用Western blot检测纹状体区腺苷A2A受体和亲代谢型谷氨酸mGluR5的表达情况。
结果:
1.A2A受体拮抗剂治疗可以减轻PD运动症状,在21天治疗时间内未出现药物耐受。
2.CSC联合L-DOPA治疗可以增强其抗PD作用,同时部分减轻肢体、口颌AIM,缓解旋转反应时间的缩短。
3.单独CSC治疗在改善PD大鼠运动症状同时并不出现异常、过度运动。
4.A2A受体拮抗剂可以降低L-DOPA治疗诱发的AEA受体、mGluR5蛋白表达的上调。
结论:
1.A2A受体参与了帕金森病LID的发生,A2A受体拮抗剂可以降低L-DOPA治疗诱发的A2A受体蛋白表达的上调,改善PD症状,延缓L,ID出现,有望成为有前景的抗PD药物。
2.A2A受体拮抗剂的应用影响帕金森病LID大鼠纹状体mGluR5蛋白表达,提示mGluR5可能是帕金森病潜在治疗靶点。