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三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer,TNBC）是乳腺癌的一种特殊分型,具有高侵袭、高转移、易复发、预后差等特点。由于缺乏有效的分子靶点,TNBC的临床治疗仍以化疗为主,但化疗药的严重副作用使其临床应用受到极大限制,因此探索靶向、低毒、高效的新型策略是TNBC治疗领域的重大挑战。利用超声和敏化剂协同作用的声动力疗法（Sonodynamic therapy,SDT）是近年来肿瘤研究中新兴的治疗手段之一。超声作为一种非浸润、可穿透深部组织的外源刺激,可以精确地聚焦在肿瘤部位,以实现声敏剂的靶向激活和药物的可控释放。随着研究的深入,声敏剂的设计也向着“智能化”、多功能化方向发展,结合影像手段实现肿瘤的可视化治疗已成为SDT研究的热点。本研究提出一种实现影像引导TNBC声动力和化疗协同治疗的方案,通过超声医学、肿瘤生物学、纳米医学等学科交叉应用,构建多功能卟啉脂质体,利用NIR成像对TNBC进行影像识别,引导超声聚焦于病变区域激发卟啉,通过声动力作用促使脂质体在特定时间、空间释放抗肿瘤药物DOX和CHK1抑制剂SRA737,发挥二者协同抗肿瘤互补优势,以实现TNBC的无创、可控、精准的声化疗协同治疗应用。研究内容及结果（1）DOX/SRA737共载卟啉脂质体的制备、表征及释药潜能通过薄膜水化法和硫酸铵梯度法分别制备不同药质比包载DOX和SRA737的卟啉脂质体,通过对其粒径、PDI系数及包封率进行测定,筛选出DOX药质比为1:20,SRA737药质比为1:50,并在此基础上制备了卟啉脂质体（PL）、载SRA737卟啉脂质体（PSL）、载DOX卟啉脂质体（PDL）以及共载SRA737和DOX卟啉脂质体（PSDL）。所制备的脂质体粒径在114-132 nm之间,大小均一,分散性良好,DOX和SRA737包封率分别为60.52%和31.34%,电位在-38到-45V之间,具有良好的体内生物相容性和循环稳定性。超声处理下PSDL中SRA737和DOX的累计药物释放率分别约为40%和70%,相对普通脂质体（无卟啉磷脂）,卟啉脂质体显示出较好的超声响应性,且呈现超声强度和处理时间依赖的可控释药潜能。（2）超声联合PSDL体外抗肿瘤效应研究流式细胞术与荧光显微镜观察发现MDA-MB-231细胞对PL的摄取具有时间依赖性;激光共聚焦显微镜观察显示,超声处理可以促进PDL在MDA-MB-231细胞中的富集,且能够增强DOX从脂质体释放并向细胞核的转运;CCK8和Calcein-AM/PI双染结果显示PSDL联合超声后在同等药物剂量和超声强度条件下能够更为显著地杀伤肿瘤细胞;流式细胞术结果表明,PSDL联合超声能够显著增强细胞凋亡的发生;通过DCFH-DA结合荧光显微镜观察细胞内活性氧含量变化,结果显示,相比超声联合PL处理和DOX处理,超声联合PSDL处理可引起细胞内产生更多的活性氧;DNA损伤实验结果表明,超声联合PSDL处理细胞,能够促进DOX向细胞核转运,与SRA737协同作用,可原位调节DNA损伤,诱导肿瘤细胞发生凋亡;细胞周期实验结果表明,超声联合载DOX卟啉脂质体促进细胞G2/M期阻滞,SRA737的加入可缓解MDA-MB-231周期阻滞,进而抑制DNA损伤修复,加剧细胞损伤,提高抗肿瘤效果。（3）超声联合PSDL体内协同抗肿瘤效应研究建立人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠原位移植瘤模型,通过尾静脉注射卟啉脂质体（PL）,利用小动物活体成像系统检测PL在荷瘤裸鼠体内的分布和富集情况,结果显示,PL在裸鼠脏器和肿瘤组织中有较强的荧光信号,12 h时荧光强度达到最大,而在24 h时,各脏器荧光强度降低,肿瘤组织中仍有强荧光信号;利用连续冰冻切片技术和荧光显微镜研究超声刺激对携载DOX卟啉脂质体在肿瘤组织中的渗透和扩散,发现超声处理可促进DOX在肿瘤细胞中富集,增强DOX在细胞核内的分布,以达到造成原位DNA损伤的效果;在体实验结果表明,相较于单独的化疗和声动力治疗,在相同的药物剂量和处理条件下,超声联合PSDL介导的声化疗协同治疗使裸鼠肿瘤组织生长受到显著抑制;通过对裸鼠主要脏器组织切片进行H＆E染色和血清生化指标分析,初步评估了超声联合DOX/SRA737共载卟啉脂质体治疗模式对裸鼠脏器组织的毒性,结果显示该治疗策略对裸鼠其他器官毒副作用较小,具有较好的生物安全性。结论本研究成功构建了对超声敏感响应的DOX/SRA737共载紫红素18卟啉脂质体—PSDL,利用聚焦超声作为外部刺激手段,实现了药物的靶向递送和可控释放。细胞实验和动物在体实验的结果证实超声联合PSDL具有明显的抗肿瘤效应,DOX和SRA737可协同发挥作用,并相互增益。PSDL能够实现基于卟啉脂质体的影像引导、声控释药和声化疗协同的多机制互作策略,可为TNBC的高效精准治疗提供数据支撑和理论依据。