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目的:慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）是临床较常见的出血性疾病,属祖国医学的“血证”、“肌衄”、“发斑”等范畴。以往认为该病是血小板免疫性破坏增多的临床综合征,免疫异常是其发病机制的核心,故又称为自身免疫性血小板减少性紫癜。随着近年来研究的不断深入,国内外均认识到免疫异常虽然是其发病的首要因素和主要机制,但并不是其全部的机制,应还有其他非免疫因素参与了CITP的发病。临床上应用强的松、长春新碱等调整CITP的免疫异常,或采用手术切脾减少血小板的免疫性破坏,并不能使所有CITP得以治愈,仍有部分病情迁延转为难治,且以上治疗方法毒副作用较大。导师陈志雄教授多年来运用疏风凉血补肾法（方）治疗CITP,疗效显著,无明显毒副作用,综合比较优于强的松等药物。本课题即主要通过动物实验和临床观察来进一步验证疏风凉血补肾法（方）的疗效,并通过对相关指标的对比观察来探讨该法（方）治疗CITP的疗效机制以及该法（方）疗效优于强的松的可能机制,同时也通过研究结果初步探讨CITP除免疫异常之外可能存在的其他发病机制。方法:1动物实验研究将SPF级BALB/C小鼠共70只随机分为正常组10只、空白模型组12只、强的松组12只、疏风凉血补肾方高剂量组12只、疏风凉血补肾方中剂量组12只、疏风凉血补肾方低剂量组12只,除正常组外其余各组均参考杨宇飞法改进,分别在1、3、5、7、9、11、13天于小鼠腹腔注射1:4稀释的豚鼠抗小鼠血小板血清（APS）,每次100μl,建立CITP小鼠模型。于造模第6天起按0.2ml/10g体重剂量每日1次、连续9天灌胃,灌胃药物分别为生理盐水、生理盐水、强的松溶液（0.5mg/ml,临床用量的10倍）、疏风凉血补肾方高浓度水煎浓缩液（2.6g/ml,临床用量的15倍）、疏风凉血补肾方中浓度水煎浓缩液（1.73g/ml,临床用量的10倍）、疏风凉血补肾方低浓度水煎浓缩液（0.87g/ml,临床用量的5倍）,于造模第15天处死小鼠取材。观察一般情况,不良反应,死亡情况,血小板计数变化,骨髓巨核细胞总数及原幼巨、颗粒巨、产板巨、裸核巨数量比例变化,血清PAIgG及骨髓TGF-β1水平变化情况。2临床研究将符合CITP诊断标准和纳入标准的50例患者随机分为疏风凉血补肾方组（A组）20例、疏风凉血补肾方加强的松组（B组）15例和以强的松为主的对照组（C组）15例,A组以疏风凉血补肾法（方）治疗,B组以疏风凉血补肾法（方）加强的松治疗（中药用法同A组,强的松用法同C组）。C组以强的松为主,加达那唑和升血小板胶囊辅助治疗,强的松按病情轻重决定用量,达那唑用量为0.2/次,3/日,升血小板胶囊用量为3粒/次,3/日。以上治疗均4周为一疗程,连续治疗3疗程后,观察不良反应,疗效,出血症状积分改善,血小板计数变化,骨髓巨核细胞总数及原幼巨、颗粒巨、产板巨、裸核巨数量比例变化,血清PAIgG及骨髓TGF-β1水平变化情况。结果:1动物实验结果1.1本实验以1、3、5、7、9、11、13天时间点于小鼠腹腔注射1:4稀释的APS,每次100μl,成功复制了CITP小鼠模型,在停止注射APS后模型维持时间为72小时左右,和文献结论相符。1.2在提高CITP小鼠血小板计数方面,疏风凉血补肾法（方）高、中、低剂量组和强的松组均能提高CITP小鼠血小板计数,和模型组比较有极显著性差异（P＜0.01）,但疏风凉血补肾法（方）高、中、低剂量组和强的松组间比较无显著性差异。1.3在降低CITP小鼠骨髓巨核细胞总数方面,疏风凉血补肾法（方）高、中剂量组均能降低骨髓巨核细胞总数,和模型组比较有显著性差异（P＜0.05）,而其组间比较无显著性差异;在提高产板巨核细胞比例上,疏风凉血补肾法（方）高、中剂量组产板巨核细胞比例上升明显,和模型组比较有极显著性差异（P＜0.01）,而疏风凉血补肾法（方）低剂量组、强的松组和模型组比较只有显著性差异（P＜0.05）。1.4在降低CITP小鼠升高的PAIgG值方面,疏风凉血补肾法（方）高、中、低剂量组、强的松组PAIgG值均下降明显,和模型组比较均有极显著性差异（P＜0.01）,而其组间比较无显著性差异。1.5在降低CITP小鼠升高的TGF-β1值方面,疏风凉血补肾法（方）高、中、低剂量组TGF-β1值降低明显,和模型组比较有显著性差异（P＜0.05）,而其组间比较无显著性差异。强的松组TGF-β1值有所下降,但和模型组比较无显著性差异。2临床观察结果2.1在临床疗效方面,A组总有效率值（90.0%）高于C组（73.3%）,和B组（93.3%）相近,但经比较三组在总有效率上无显著性差异;在良效率方面,A组（55.0%）显著高于C组（20.0%）（P＜0.05）,和B组（60.0%）相近。2.2在降低出血症状积分方面,A、B两组均能有效降低出血症状积分,治疗前后比较有显著性差异（P＜0.05）,而C组治疗前后出血症状积分比较无显著性差异。2.3在提高血小板计数方面,A组治疗后血小板计数明显上升,和治疗前比有极显著性差异（P＜0.01）,且其明显优于C组（P＜0.05）,和B组疗效相似。2.4在降低骨髓巨核细胞总数和提高产板巨比例方面,A组治疗后骨髓巨核细胞总数明显降低、产板巨比例明显上升,和治疗前较比有极显著性差异（P＜0.01）,和B组疗效相似。而C组治疗后骨髓巨核细胞总数有所减低、产板巨比例有所上升,但治疗前后对比无显著性差异。2.5在降低PAIgG值方面,A、B、C三组治疗后PAIgG值明显降低,和治疗前比较均有显著性差异（P＜0.05）。三组治疗后比较无显著性差异。2.6在降低TGF-β1值方面,A、B二组治疗后TGF-β1值明显降低,和治疗前比差异显著（P＜0.05）,C组TGF-β1值有所下降,但和治疗前比无显著差异。A、B二组和C组治疗后比较均有显著性差异（P＜0.05）,A、B二组治疗后比较无显著性差异。结论:1动物实验显示,疏风凉血补肾方三个剂量组均能有效降低CITP小鼠升高的PAIgG和TGF-β1值,有效降低CITP小鼠骨髓巨核细胞总数和提高产板巨核细胞比例,从而有效促进骨髓巨核细胞分化成熟和提高血小板计数,其作用综合比较优于强的松组;疏风凉血补肾方三个剂量组间以高、中剂量组疗效最佳,但高剂量组可能出现剂量相关副作用,故中剂量（相当于临床常用量）组应为最佳剂量组。2临床观察显示,疏风凉血补肾方能有效降低CITP患者升高的PAIgG和TGF-β1值,有效促进骨髓巨核细胞分化成熟（表现在降低骨髓巨核细胞总数和提高产板巨核细胞比例上）,有效提高CITP患者血小板计数,其作用综合比较优于以强的松为主的对照组;本实验中疏风凉血补肾方加强的松组和单纯的疏风凉血补肾方组疗效相近,考虑这和所入选的病例较多是经强的松类药物治疗无效而转诊我院有关,强的松对这部分患者的疗效已很有限,故强的松在该组治疗中未能起明显的增效作用。3动物实验和临床观察均显示,疏风凉血补肾方对降低CITP升高的PAIgG和TGF-β1值均有良好作用,而强的松在本研究中只对PAIgG值有较好的降低作用,而对TGF-β1值无显著性降低作用,这可能就是疏风凉血补肾法疗效优于强的松的机理之一。4动物实验和临床观察中,强的松组和以强的松为主的对照组在用药后PAIgG值均明显降低,而TGF-β1值无显著性下降,这与目前的某些类似研究结论相似。以往认为TGF-β1升高是由于CITP免疫异常状态时体内升高的PAIg导致血小板和巨核细胞遭受免疫性破坏TGF-β1从中释放出来造成的,PAIg和TGF-β1值呈正相关性,经治疗干预PAIg值降低后TGF-β1值也应随之下降,而本研究及其他类似研究的结论与此观点有不一致性的地方。因此我们有理由推论:免疫异常并不是CITP时TGF-β1升高的全部原因,免疫异常触发后的非免疫依赖因素也可引起TGF-β1水平的增高,这也可能是CITP除免疫异常之外的其他重要发病机制之一。综上所述,疏风凉血补肾法（方）对CITP有较好的临床疗效,其疗效机制之一可能就在于该法能有效降低PAIg水平及免疫异常和非免疫因素造成的TGF-β1水平的升高,从而更有效的促进骨髓巨核细胞的分化成熟,这也可能是该法疗效优于强的松的关键原因所在。同时,免疫异常触发后的非免疫依赖因素导致的TGF-β1的增高可能也是CITP除免疫异常之外的其他发病机制之一及CITP难治性的关键所在。对此有待更多的后续研究去加以验证。