乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，AChE）是一种分泌型羧酸脂酶，能够水解神经递质乙酰胆碱酯，它在胆碱能神经系统中起着非常关键的作用。近年来发现它不仅存在于神经系统，在其他组织细胞及癌细胞中也有发现。有文献报道称乙酰胆碱在部分细胞中具有促进细胞生长和抑制细胞凋亡的作用，那么AChE在肿瘤细胞中具有什么样的活性？是否可以用于肿瘤的基因治疗？据此，我们进行了以下探索。1检测了多种癌症患者癌及癌旁组织中AChE的水平，发现AChE在胃癌、胰腺癌和肾癌等的癌组织比癌旁组织中的水平低。2构建携带AChE的重组质粒，与慢病毒包装质粒共同转染293T细胞，获得携带AChE的重组慢病毒。用该重组慢病毒感染293T及不同的癌细胞，经筛选得到携带AChE的稳转细胞系，分别检测了AChE对胃癌及其他来源癌细胞的作用。研究证明，过表达AChE不能抑制胃癌细胞系AGS生长，也不能增强AGS细胞对化疗药物敏感性，但过表达AChE基因却可以抑制肝癌细胞系SMMC-7721的生长。3构建AChE的非复制型腺病毒Ad.AChE和复制型腺病毒ZD55.AChE，检测其在不同癌细胞系及正常成纤维细胞中的作用。结果表明，以非复制型腺病毒为载体时（即Ad.AChE），AChE能够抑制胃癌细胞的生长，并能抑制其他多种类型肿瘤细胞的活力，但对原代培养成纤维细胞没有生长抑制等毒副作用。以复制型腺病毒为载体时（即ZD55.AChE），AChE对胃癌细胞的杀伤作用明显强于Ad.AChE和ZD55，它对多种来源的其他肿瘤细胞也有杀伤作用，但成纤维细胞则几乎不受影响。4应用流式细胞仪分选出胃癌干细胞，并检测了Ad.AChE和ZD55.AChE对其生长的抑制作用。结果表明，二者对胃癌干细胞具有明显的生长抑制作用，ZD55.AChE作用尤其显著。5本文探讨了AChE杀伤细胞的途径。结果发现，ZD55.AChE可以诱导胃癌细胞系AGS发生凋亡，其凋亡过程依赖于caspase的活化。通过JC-1染色发现，ZD55.AChE可以引起AGS细胞线粒体的膜电位发生改变，表明ZD55.AChE是通过线粒体途径诱发AGS细胞凋亡的。6利用胃癌细胞系MGC80-3和NCI-N87构建裸鼠体内移植瘤模型，瘤内注射病毒Ad.AChE和（或）ZD55.AChE并跟踪测量瘤子大小。结果表明，ZD55.AChE对肿瘤的生长都有很明显的抑制效果。以上研究结果表明：AChE的表达水平在癌组织和癌旁组织中具有明显的差别；AChE重组腺病毒不仅可以诱发多种癌细胞和胃癌干细胞的细胞凋亡，对于体内移植瘤的生长也具有显著的生长抑制作用。因此，AChE是一个新的候选基因，在肿瘤的基因-病毒靶向治疗中具有广泛的应用前景。