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恶性肿瘤的死亡率现已成为世界死因的第一位。恶性黑色素瘤简称恶黑（malignant melanoma，MM），是一种主要发生在皮肤的黑色素细胞肿瘤，是皮肤癌中的一种，易发生转移，恶性程度高，约占全身恶性肿瘤的1%［1，2］，亦可见于消化系统黏膜、生殖系统的黏膜，眼部以及脑膜的脉络膜等［3-5］。本课题在前期研究的基础上探讨新藤黄酸对小鼠黑色素瘤细胞株B16增殖抑制的影响及其抗肿瘤的可能机制，为将新藤黄酸开发为抗肿瘤药物提供了相应的理论依据。目的：研究新藤黄酸对黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用，并探讨细胞凋亡机制在其中的角色。方法： MTT实验检测新藤黄酸对B16细胞生长和增殖的作用；采用acridineorange/ethidium bromide (AO/EB)荧光染色和Hochest33258荧光染色观察新藤黄酸对B16细胞的影响。流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染检测新藤黄酸诱导B16细胞的凋亡发生率。采用流式细胞仪检测新藤黄酸处理B16细胞后细胞内活性氧（ROS）的产生；Western blotting法检测凋亡相关蛋白Caspase-3的变化，并检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、p-mTOR、PTEN蛋白的变化以探讨新藤黄酸诱导B16细胞凋亡的分子机制。结果：（1）MTT法实验结果表明新藤黄酸在一定浓度下对黑色素瘤B16细胞的增殖有明显抑制作用，且呈一定的时效和量效依赖关系。（2）荧光显微镜观察新藤黄酸处理黑色素瘤B16细胞后形态学变化；AO/EB染色观察发现正常细胞染色正常，细胞密度较大；凋亡细胞或损伤细胞呈现橘黄色荧光，细胞密度降低。新藤黄酸处理的细胞呈现明显的凋亡状态。（3）荧光显微镜观察新藤黄酸处理黑色素瘤B16细胞后，Hochest33258染色结果显示，正常细胞呈现均一暗淡的蓝色荧光；新藤黄酸处理的细胞中则呈现蓝白色、碎块状致密浓染，具有明显的凋亡特征。（4）新藤黄酸处理细胞后，细胞内活性氧的急剧增加，与未给药组比较具有显著性差异（P<0.01），同时线粒体膜电位也随之下降。（5）流式细胞仪检测结果表明，新藤黄酸作用于黑色素瘤B16细胞后，细胞凋亡率随药物浓度的增大而升高。（6）Western blotting检测发现Caspase-3和PTEN等蛋白在新藤黄酸作用后表达量都有所增加；p-PI3K、p-Akt蛋白和p-mTOR等蛋白表达呈现下调趋势；而PI3K、Akt蛋白的变化趋势不明显。结论：新藤黄酸在一定的时间和浓度范围内能够抑制黑色素瘤B16细胞的增殖，诱导细胞发生凋亡，其诱导细胞凋亡的机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。