儿茶素成分的提取纯化与逆转人肝癌和口腔鳞癌多药耐药性及其作用机制研究

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肿瘤化学治疗最大障碍之一是肿瘤细胞对药物的耐药性,其中MDR是肿瘤治疗中亟待解决的问题。在目前尚未有MDR逆转剂用于临床的情况下,从天然药物中寻找高效、低毒、价廉的耐药逆转剂是目前的研究热点。儿茶素成分具有多种药理作用,其中包括防癌抗癌作用,但迄今国内外未见儿茶素逆转人肝癌和口腔癌MDR作用的报道,而且对某些肿瘤的逆转也缺乏体内逆转实验支持。本研究改良Z191 1 09820.8专利法提取儿茶素单体成分,以人肝癌MDR细胞株和口腔鳞癌MDR细胞株为研究对象,利用细胞和分子生物学等多项实验技术,从体内外探讨其逆转作用和机制,同时对逆转作用与肿瘤细胞凋亡的关系和两种儿茶素单体成分的构效关系也作了分析探讨,为扩大儿茶素抗肿瘤的应用范围和改进肝癌化疗疗效和提升我区自主产权新药的研发水平提供理论依据。 研究内容 (一) EGCG、ECG的提取分离 方法:用7L91 1 09820.8专利方法作改进分离提取两种儿茶素成分。经薄层层析定性、高效液相鉴定和分光光度法在530mm处测定茶多酚及其单体标准品与样品吸光度值,依照标准曲线求出样品茶多酚纯度。从广西绿茶中成功提取茶多酚并进一步分离出2种单体成分:EGCG、ECG,两种儿茶素成分与相应的标准品比移值无差别(P>0.05),该法工艺简单、得率高、成本低,是一种较为理想的分离方法。 (二) 两种儿茶素单体成分体外逆转人肝癌和口腔鳞癌多药耐药性的实验研究及其构效分析 方法:多药耐药细胞株选择及培养,MTT法检测细胞毒性,测定耐药
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