黑盖木层孔菌培养特性及胞外酶活性的研究

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhangyanruru
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本文对采自长白山的黑盖木层孔菌木质子实体进行了分离纯化和初步鉴定,通过对其在固体培养基上生长的菌落形态和菌丝的微观观察,依据《真菌鉴定手册》和相关文献确定该菌为担子菌亚纲(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceace)、木层孔菌属(Phellinus)菌类。在此基础上对该菌株在不同培养条件下的固体和液体培养基组成进行了优化。由于该菌是一种木腐真菌,所以对其胞外酶系进行了初步的研究,确定了该菌具有比较完整的利用多糖和木质素的胞外酶系,为其进行大规模发酵的可行性提供了理论依据。实验结果具体如下:1.利用组织分离技术对黑盖木层孔菌的木质子实体进行分离纯化,得到其可在斜面培养基和平板培养基上生长的棕黄色菌丝体的菌落形态;通过对其菌落形态和菌丝体的微观观察,依据《真菌鉴定手册》和相关文献确定该菌为担子菌亚纲(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polyporales)、多孔菌科(Polyporaceace)、木层孔菌属(Phellinus)菌类。2.黑盖木层孔菌在不同培养条件下的固体和液体培养基组成进行了优化。在固体培养条件下,从蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、乳糖等四种碳源和硝酸钾、硝酸铵、尿素、酵母粉、马铃薯、大豆粉、麸皮、玉米面等九种氮源中利用单因素优化和正交试验优化法筛选出其最佳生长的碳源和氮源分别是蔗糖和麸皮。在液体培养条件下,从蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、乳糖等四种碳源和酵母粉、马铃薯、麸皮、玉米面等四种氮源中利用单因素优化和正交试验优化法筛选出其最佳生长的碳源和氮源分别是葡萄糖和麸皮。同时菌种在固体和液体培养基中生长的最佳温度为28℃,最佳PH值为中性偏酸。3.为了掌握液体培养黑盖木层孔菌菌丝体对环境因子的生物利用度和对活性酶的生产能力,本文首次对黑盖木层孔菌液体培养菌丝体的四种胞外酶的活性进行了测定,培养天数为18d,隔天取样,一次性测定各种胞外酶的活性。测定结果表明黑盖木层孔菌具有比较完整的胞外酶系,具备大批发酵生产菌丝体所需的条件。淀粉酶、漆酶、愈创木酚酶的活性高峰分别出现在第6d,第10d,第14d,说明黑盖木层孔菌对淀粉类物质、木质素类物质均具有降解能力。培养液中的蛋白质及还原糖的高峰期分别出现在第10d和第12d,表明蛋白质的收集宜在第10d进行,还原糖的收集宜在第12d进行。
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