根据嗜水气单胞菌16srDNA和气溶素序列设计引物,建立双重PCR检测体系。用该方法对本实验室保存的23株嗜水气单胞菌进行检测,与脱脂奶平板检测结果的符合率为100%。在双重PCR基础上,增加嗜水气单胞菌丝氨酸胞外蛋白酶和弹性胞外蛋白酶的引物,建立和优化嗜水气单胞菌的多重PCR检测体系。结果表明已建立的双重PCR检测体系能够覆盖嗜水气单胞菌多重PCR的检测结果,可准确、快速、稳定地鉴别致病性嗜水气单胞菌。根据以上结果,组装致病性嗜水气单胞菌双重PCR检测试剂盒,并起草《嗜水气单胞菌PCR检测试剂盒检验检疫规程》。用该试剂盒检测了从南京地区卫岗,小卫街等四处农贸市场的的200份鱼样和从常熟、兴化、临沂、赣榆、郑州、南京等六个市区多个规模化渔场收集的水样和病料,从中共检测出8株嗜水气单胞菌,其中4株为致病性嗜水气单胞菌。参照GB／T 186522-2002致病性嗜水气单胞菌检验方法,用J-1株胞外蛋白酶EPR2-3重组蛋白高免血清为抗体,优化检测致病性Ah的Dot-ELISA检测方法。用该方法对本实验室保存的23株嗜水气单胞菌进行检测,与双重PCR检测试剂盒的检测结果符合率为91.3%。