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隐花色素(CRYPTOCHROME,简称CRY)是一类在植物和动物体内普遍存在的蛋白,具有感受蓝光和调节重力感应等功能。在植物中,CRYs作为蓝光受体,能够影响蓝光诱导的花发育、生物钟、昼夜节律调控和幼苗形态建成等过程。在模式植物拟南芥中,CRY1主要介导蓝光抑制下胚轴的伸长,CRY2则主要介导蓝光促进光周期控制的开花,为了进一步研究隐花色素CYR2的调控功能,通过筛选带有CRY2-LUC转基因的EMS诱变突变体库,分离鉴定出一个SUS2/PRP8基因的等位基因突变体,我们将突变体命名为mac1(more abundant of cry2 1),并对MAC1基因的功能进行初步的探索。主要的实验结果如下:1、筛选EMS诱变库并获得一个具有早花表型,并且CRY2表达量上调的突变体植株,将其命名为mac1。通过多态性分子标记对mac1突变体进行图位克隆,确定突变位点位于MAC1基因第六个外显子发生了碱基突变,一个鸟嘌呤核苷酸(G)突变成了腺嘌呤核苷酸(A),导致甘氨基酸变成了精氨基酸。2、构建MAC1基因的CRISPR/Cas9敲除载体并转化拟南芥,获得mac-cr突变体材料,对获得的突变体植株进行表型观察发现,mac-cr具有与mac1突变体一样的表型。该结果表明CRISPR/Cas9杂合突变体(mac-cr)的表型是由于MAC1基因突变造成的。3、利用Western Blot实验以及qRT-PCR检测CRY2基因在mac1突变体中的表达情况,发现在转录水平上MAC1对于CRY2基因的表达没有影响,而是发生在转录后水平影响了CRY2蛋白的降解过程。4、通过对mac1纯合突变体开花时间统计,确定mac1在长日照下表现出早花表型。通过对不同光照下下胚轴的测量发现,mac1在蓝光、红光以及远红光下均表现出下胚轴变短的表型。以上结果表明MAC1在调控CRY2蛋白降解,调控拟南芥开花及下胚轴伸长等方面发挥功能。该研究为进一步了解MAC1基因的功能及其在光信号网络系统中的作用提供了依据。