枇杷花提取物抑菌作用及相关有效成分研究

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采用超声波法和回流法,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等不同极性溶剂对枇杷花样品进行提取,再通过打孔法、试管法对枇杷花不同溶剂提取物进行了抑菌作用研究。实验表明:中等极性和弱极性提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌抑菌圈达到12~17mm(空白为9mm),且抑菌作用与提取物浓度呈依赖关系,说明上述提取物有较好的抑菌作用。为了探究其中具有抑菌作用的提取部位及其化学成分,用硅胶柱层析分离石油醚提取物,得到片段M1~M24;抑菌研究结果表明,用石油醚洗脱分离的弱极性片段M1~M3对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌有明显的抑菌效果;用石油醚:乙酸乙酯为50:1~15:1洗脱分离的中等极性片段M7~M12仅对白色念珠菌有较明显的抑菌效果。用大孔树脂D101分离丙酮提取物,得到片段D1~D6,抑菌研究结果表明,50%乙醇洗脱的分离片段D3、75%乙醇洗脱的分离片段D4仅对白色念珠菌有较好的抑菌效果。由于片段得到M2抑菌效果最好,再用低温离心法对其进一步分离纯化,得到A1和A2:对M1、A1、A2、M3进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析,确定其中主要成分为n-C17~n-C27烃类化合物,说明烷烃类物质对上述三种菌具有很好的抑制作用;低温离心分离所得片段A2,经GC-MS分析仅检测到两个主要峰,为烷烃类物质C24、C27,说明采用低温离心分离法能够很好地对烷烃样品进行纯化。将分离片段M1、A1、A2、M3、D3和D4进行最低抑菌浓度(MIC)测试,结果表明,M1、A1、A2、M3对金黄色葡萄球菌MIC值分别为0.625mg.mL-1、2.500 mg.mL-1、0.313 mg.mL-1、1.250 mg.mL-1;对大肠杆菌MIC值分别为0.625 mg.mL-1、2.500 mg.mL-1、0.625 mg.mL-1、2.500 mg.mL-1;对白色念珠菌MIC值分别为0.625 mg.mL-1、1.250 mg.mL-1、0.625 mg.mL-1、1.250mg.mL-1;由上数据可知,经纯化后样品A2对三种受试菌的抑菌效果好于其他各受试物,因此推测起抑菌作用的物质应主要为C24、C27。D3、D4对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌无抑制作用,其对白色念珠菌MIC值分别为2.500mg.mL-1、2.500 mg.mL-1
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