EBV转化淋巴母细胞中CXCR4,c-FOS,FYN,PTPN11基因表达检测与分析

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:luther2006
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]前期课题组筛选出EBV诱导淋巴细胞转化的4个关键分子,分别是CXCR4,c-FOS,FYN,PTPN11基因。本课题通过荧光定量PCR和Western blot技术检测正常人淋巴细胞和体外EBV转化淋巴母细胞中CXCR4,c-FOS,FYN,PTPN11差异表达情况,验证前期课题组基因芯片结果,为EB病毒转化淋巴细胞的分子机制提供实验依据。  [方法]采集7例健康献血员外周静脉血并从中分离出正常人淋巴细胞,用EBV体外诱导淋巴细胞转化,构建永生化的淋巴母细胞模型。提取EBV转化淋巴母细胞及配对的正常人淋巴细胞的蛋白及RNA,应用Western blot和荧光定量PCR方法,检测CXCR4,c-FOS,FYN,PTPN11基因在7例EBV体外转化的淋巴母细胞及配对的健康成人正常淋巴细胞中的表达。  [结果]本实验成功建立了7例EBV转化淋巴母细胞样细胞系,并检测了CXCR4,c-FOS,FYN,PTPN11基因在7例EBV转化淋巴母细胞及配对的正常人淋巴细胞中的表达情况。CXCR4基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞CXCR4的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达下调2.718倍,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,CXCR4在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达下调1.894倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。c-FOS基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞中c-FOS的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达下调2.641倍,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,c-FOS在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达下调2.323倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。FYN基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞中FYN的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达下调2.451倍,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,FYN在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达下调2.019倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。PTPN11基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞PTPN11的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达上调2.057倍,差异具有统计学意义(P<0.01);Western Blot结果显示,PTPN11在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达上调2.127倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。  [结论]1. CXCR4在转化淋巴母细胞中的蛋白表达和mRNA转录均低于其在正常人淋巴细胞。2. c-FOS在转化淋巴母细胞中的蛋白表达和mRNA转录均低于其在正常人淋巴细胞。3. FYN在转化淋巴母细胞中的蛋白表达和mRNA转录均低于其在正常人淋巴细胞。4. PTPN11在转化淋巴母细胞中的蛋白表达和mRNA转录均高于其在正常人淋巴细胞。
其他文献
随着中国移动通信网络的飞速发展,直放站等网络优化设备作为基站系统的补充与延伸,得到了业界广泛的应用,它的出现为无线网络覆盖领域增加了新的解决方案,解决了诸多实际网络
背景:平滑肌细胞(SMC)的过度增生是血管病变发生发展中的重要环节。长久以来的观点认为动脉粥样硬化(AS)斑块中的SMC源于中膜SMC的迁移和增生。虽然对于中膜SMC的迁移和增殖
日本国内1979年茶叶消费量达十一万三千吨,94%是绿茶(玉露、包种茶、点茶、煎茶、玉绿茶、番茶),近年来增加了七千吨红茶,增长6%。日本茶树品种是从中国引入的,后来从印度阿
他出生于密西西比州一个黑人家庭。由于兄妹众多,加上父母收入低下,他们的日子过得捉襟见肘,以至于年少时想买一辆自行车也成了一个遥不可及的梦。不过,贫困的生活并没有让他
前言锌离子是机体重要的微量元素之一,是多种酶和蛋白质的重要组成部分。在中枢神经系统,锌离子的含量极为丰富。大量的研究表明,游离锌离子作为一种神经调质,与谷氨酸等神经
目的: 研究PTTG、VEGF、TGF-β1、TGF-RII在肝脏疾病中表达的规律,探索其与肝癌发生发展的关系;进一步弄清楚PTTG、VEGF、TGF-β1、TGF-RII蛋白表达的内在联系,是否有相互作
哺乳动物的受精是由一系列精卵质膜的相互作用而触发的,包括:精卵识别、精卵结合和精卵质膜融合。其中精卵质膜融合是受精过程最为关键的步骤,但其机制目前尚未明了。本研究运用
目的:构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白32(culture filtrate protein 32,CFP32)的重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化重组蛋白CFP32,探讨其在结核病血清学诊断中的应用价值。方法:PCR扩增CFP32基因片段,将其克隆到pET-21a表达载体。优化表达条件,Ni-NTA亲和层析方法纯化重组CFP32蛋白。建立检测CFP32抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,并用于检
A clinical trial of radiotherapy with modified simultaneous integrated boost(SIB)technique against huge tumors was conducted.A 58-year-old male patient who had
AIM:To explore the potential of β-elemene as a radiosensitizer for gastric cancer cells and the underlying mechanisms.METHODS:SGC7901,MKN45,MKN28,N87,and AGS h