【摘 要】
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目的:探索亚剂量多西环素（Dox）对非酒精性脂肪肝炎（NASH）的药理作用。方法:第一部分,使用大鼠胰岛进行体外培养,并使用Dox刺激胰岛并检测胰岛组织分泌的胰岛素含量。根据血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平将14只15周龄的db/db小鼠随机分为模型组（Model组,n=7）和药物干预组（Dox组,n=7）;C57小鼠作为正常对照组（NC组,n=6）。NC组小鼠饲喂维持饲料;
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目的:探索亚剂量多西环素（Dox）对非酒精性脂肪肝炎（NASH）的药理作用。方法:第一部分,使用大鼠胰岛进行体外培养,并使用Dox刺激胰岛并检测胰岛组织分泌的胰岛素含量。根据血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平将14只15周龄的db/db小鼠随机分为模型组（Model组,n=7）和药物干预组（Dox组,n=7）;C57小鼠作为正常对照组（NC组,n=6）。NC组小鼠饲喂维持饲料;Model、Dox组饲喂蛋氨酸胆碱缺乏（MCD）饲料4周,建立MCD-NASH模型。Dox组每日给予小鼠体重相应亚剂量多西环素（12 mg/kg）灌胃,NC、Model每日给予体重相应生理盐水灌胃。每周测定动物体重两次,两周测定动物空腹血糖一次。给药四周后,取小鼠血清进行血生化检测,取小鼠肝脏切片进行HE、油红O以及天狼猩红染色,测定肝细胞内硬脂酰辅酶A去饱和酶-1（SCD-1）、酰基辅酶A氧化酶1（ACOX1）、脂肪酸转运体（CD36）的表达量,检测血浆中小鼠糖脂代谢相关因子的含量。第二部分,根据体重、血清中的ALT、AST水平将33只17周龄雄性ob/ob小鼠随机分为模型组（Model组,n=9）、低剂量药物干预组（Low Dox组,n=12）以及高剂量药物干预组（High Dox组,n=12）;C57小鼠作为正常对照组（NC组,n=8）。使用维持饲料饲喂NC组小鼠;Model、Low Dox、High Dox组饲喂Gubra淀粉纤维素NASH（GAN）饲料10周,建立GAN-NASH模型;Low Dox组每日给予小鼠体重相应亚临床剂量Dox（15 mg/kg）灌胃,High Dox组每日给予小鼠体重相应亚临床剂量Dox（30 mg/kg）灌胃,NC、Model每日给予体重相应生理盐水灌胃。每周测定动物体重、饮食量一次,两周测定动物血糖一次。给药十周后,取小鼠血清进行血生化检测,称量动物肝脏、附睾脂肪、肾脏、脾脏重量,取小鼠肝脏切片进行HE、天狼猩红染色,检测血浆中小鼠糖脂代谢相关因子及细胞因子的含量。结果:1.Dox能够促进离体大鼠胰岛组织胰岛素的分泌。Dox的干预降低了MCDNASH小鼠血清中甘油三酯（TG）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平,促进抑胃肽（GIP）、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、胰岛素（Insulin）的分泌,减小肝细胞内的脂滴面积,降低肝脏内CD36 m RNA的表达水平。2.高、低剂量组Dox干预均使GAN-NASH小鼠随机血糖、饮食量下降,减轻脾脏重量,减少血清中脂肪酶（LPS）的水平,降低IL-17A的表达,高剂量组Dox促进Ghrelin、Leptin及GIP分泌,低剂量组Dox促进Ghrelin分泌。高、低剂量组Dox肝脏纤维化均显著减轻,且具有浓度梯度依赖性。结论:亚剂量Dox（12 mg/kg）改善MCD-NASH小鼠肝脂肪变性;同时降低血脂水平,减少脂质蓄积对肝细胞的损伤,改善肝功,保护肝脏,调节小鼠体内的脂代谢紊乱。与MCD-NASH小鼠相比,GAN-NASH小鼠出现纤维化,30 mg/kg Dox显著改善了GAN-NASH小鼠的纤维化;亚剂量Dox（15mg/kg、30mg/kg）在GAN-NASH小鼠体内具有糖依赖性的降糖效果,能抑制食欲,保护胰腺、维持脾脏正常质量,降低血浆中的炎性因子,改善NASH的糖脂代谢异常。本研究为Dox在NASH药物研究方面的开发利用提供理论依据。
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