玉米花粉中类似于mRNA的非编码RNA基因(ZM401)的克隆及其功能研究

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高等植物的花粉作为雄配子体,包含了在雌配子体结合完成受精过程所需要的全部遗传信息,在植物的整个生殖周期中发挥着重要作用.正是由于花粉的这一重要作用,使其成为生物化学和分子生物学领域研究基本规律性问题的首选对角.利用分子生物学手段克隆植物花粉发育过程中特异表达的基因,对于我们从分子水平了解植物花粉的发育过程具有重要的意义.该研究利用差异筛选方法,并结合冷噬菌斑筛选,从玉米成熟花粉cDNA文库中分离得到了9个化粉特异性表达的cDNA克隆,选取其中之一ZM401克隆进一步分析鉴定.采用Northernblot和RT-PCR技术研究ZM401基因表达的时空特异性.采用生物学软件分析ZM401基因的序列和结构,该基因不具有蛋白质编码区,序列中最长的开放阅读框架只有80个氨基酸.构建了包含ZM401正义、反义基因的植物表达载体,35S启动子控制下在烟草中异位表达研究基因的功能,共得到67棵转基因烟草植株.ZM401基因在烟草中能够正常转录.表明ZM401基因在植物的花粉(或花药)发育过程中发挥着重要作用.
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