间隙连接(gap junction)是细胞间连接的一种，介导细胞间电信号直接传递和小分子亲水物质的交换，是细胞间直接通讯的一种重要方式。间隙连接在卵泡的形成、发生、发育过程中有着非常重要的作用，在受精过程中也起到一定的调控作用，在哺乳动物胚胎着床前已经建立。　　间隙连接蛋白(connexin)是组成细胞间隙连接通道的基本单位，在哺乳动物早期胚胎发育过程中具有表达的特异性。间隙连接蛋白在内质网上合成，是一类四次跨膜的膜蛋白，在反式高尔基体上开始装配成多聚体，六个间隙连接蛋白相互作用形成六聚体，构成一个六角形的亲水通道，称为连接子(connexon)。间隙连接是由位于两个相邻细胞的细胞膜上的两个连接子相互对接形成。　　Cx31.1由273个氨基酸组成，其分子量为31.088 kD，主要在睾丸及皮肤等上皮组织表达，在生殖方面具有一定的生物学作用。我们采用免疫共沉淀技术，从细胞中分离Cx31.1相互作用蛋白质，酶解后进行高效液相色谱串级质谱分析(HPLC-MS/MS)，鉴定出Cx31.1结合蛋白，结果中包含有5个与生殖相关的蛋白。选取GAGE家族进行进一步基因表达水平的检测，结果显示细胞中Cx31.1表达量上升时，GAGE家族基因的表达水平均有显著下降。　　间隙连接蛋白家族在细胞中半衰期都比较短。Cx31.1在最近的报道中发现其表达水平在非小细胞肺癌细胞系当中有显著下降，Cx31.1在抑制细胞增殖、转移、侵袭等方面都有一定作用，可认为是一个肿瘤抑制因子。然而，目前对细胞如何维持Cx31.1的含量没有相应的研究。在细胞中，蛋白总是被不断地合成和降解，因此我们针对Cx31.1在细胞中的降解机制进行了研究。　　我们的实验结果显示，Cx31.1可能通过泛素-蛋白酶体途径(UPS)和自噬-溶酶体途径进行降解。用MG-132抑制UPS之后，细胞中Cx31.1的含量有所上升但是不能完全抑制Cx31.1在细胞中的降解。自噬是一种能被例如饥饿等细胞应激诱导发生的降解过程，与一些疾病相关。在稳定表达Cx31.1的H1299细胞中，饥饿或者Brefeldin A诱导自噬发生后，细胞中Cx31.1的水平有显著的下降;用3-MA或氯喹抑制自噬过程的情况下，细胞中Cx31.1的含量有所上升。用siRNA干扰自噬相关基因atg5的表达之后，Cx31.1的减少水平有了很大的抑制。之后，我们观察到Cx31.1在细胞中与自噬体膜的marker LC3有共定位的现象。将Cx31.1用胶体金二抗免疫标记后，我们在透射电子显微镜下观察，看到Cx31.1可以被包裹在一个双层膜的结构当中，提示了Cx31.1会被自噬体所包裹而进行降解。　　泛素-蛋白酶体途径和自噬-溶酶体途径并不是完全相互独立的，它们可能通过一些例如p62等联结蛋白发生相互的联系。我们用siRNA干扰的方法下调p62在细胞中的表达水平，发现细胞中Cx31.1的含量有所上升，意味着Cx31.1的降解可能受到了影响。　　综合得到的实验结果，本课题的研究显示了Cx31.1可能在生殖相关方面发挥一定的作用。在细胞中，泛素-蛋白酶体途径或者自噬-溶酶体途径都参与了Cx31.1的降解过程，这两条途径可能通过p62产生一定的联系。