抗生素生产废水中抗药菌的筛选和去除研究

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全球范围的抗生素抗药致病菌和抗药基因的扩散已经成为威胁人类健康安全的重要问题。抗生素的低剂量长时间暴露导致环境中抗药菌比例不断增加,而抗生素的广泛应用以及抗生素生产废水排放是导致低剂量长时间抗生素暴露的主要根源。一些抗生素作为广谱抗菌药物,被广泛地用于人类和动物疾病的预防和治疗。一些制药废水中由于含有大量的抗生素导致抗药菌比例不断的增加,因此如何有效的对含有抗药菌的废水进行处理成为废水处理过程中亟待解决的难点问题。本课题针对含有高浓度抗生素的制药废水中的抗药菌问题,系统的讨论了用不同的消毒方式(氯消毒剂、紫外、臭氧)对废水中的抗药菌和总菌的去除研究,取得了如下主要进展:1、根据菌落形态结构的不同,用平板划线法从高碑店污水处理厂的活性污泥中驯化出了六株抗药菌,经过DNA的提取、PCR测序,测序结果比对后得到三株菌株分别为:Microbacterium keratanolyticum、Leucobacter chromiireducens。Klebsiella terrigena。用相同的方法从污泥中分离出了10株酵母菌,用新鲜的冻融菌液直接做PCR,测序结果比对后得到三株菌株,分别为:Candida glabrata、Dipodascus ingens、Schizoblastosporion chiloense。2、用氯消毒剂研究前期工作中分离出的两株细菌(抗药菌)和无抗药性的大肠杆菌的去除效果。氯消毒剂对分离纯化出的纯抗药菌能够有效的去除,去除时间很快且去除效率高,和无抗药性的大肠杆菌去除效果相比,具有较强抗药性的抗药菌并不具有较高的耐氯性。氯消毒剂去除从污泥中分离纯化出的抗药菌,在反应时间5 min、有效氯浓度为2 mg/L或者有效氯浓度为5 mg/L、反应时间2 min时,去除效率都能达到99%。验证了氯消毒剂是通过使细菌的细胞壁破裂、细胞内的蛋白质核酸等物质流出让细菌失去活性,细胞壁破裂以后会释放出K+,消毒时间越长、有效氯的投加量越大,反应完成后释放的K+量就越多。3、和纯菌的去除效果相比,要有效的去除实际废水的细菌和抗药菌,需要增加氯消毒剂的投加量、延长反应时间,才能达到理想的效果。主要是因为废水中含有较高的氨氮,起消毒作用的不是自由氯而是氯胺;消毒剂投加量为100 mg/L、反应时间为2.5 h时,总菌和抗药菌的去除效率约为99%。氯消毒剂消毒实际废水后,出水水质的氨氮、DOC的含量有所降低,但变化不是特别明显,对色度和浊度有了相对比较高的去除作用。由测余氯实验结果可知,有效氯浓度较高时相当长的时间内都有余氯存在,从平板上挑取的菌株都是高效的耐氯菌。4、氯消毒剂对制药废水中的总菌和抗药菌能有效的去除;有效氯浓度为20mg/L时,总菌和抗药菌的去除效果达到了2.75~3.0Log。臭氧消毒和氯消剂的去除效果有相似之处,臭氧到一定剂量后自身分解的速度会加快,臭氧浓度为60mg/L时,约有约有3.25Log的总菌和抗药菌被去除,臭氧浓度为100 mg/L时,总菌的去除为3.5Log。为了抑制臭氧的自我分解,可以考虑在实际工作中臭氧的浓度定为30~60 mg/L。紫外消毒已经广泛的作为消毒剂使用,紫外照射也能有效的去除制药废水中的总菌和抗药菌,随着照射时间的延长,总菌和抗药菌都被进一步的灭活。
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