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目的:探讨HPRT基因位点突变及彗星试验对宫颈癌放疗的疗效损伤评估作用,研究剂量-效应关系。 方法:取15例宫颈鳞癌放疗患者放疗前及放疗累积剂量为10、20、30、40、50、60Gy时的外周静脉血,采用多核细胞法测HPRT基因位点突变率,以单细胞凝胶电泳(SCGE)或称彗星试验检测淋巴细胞的DNA损伤。 结果:1.HPRT基因位点突变率在照射后升高,与照射前相比,在照射累积剂量为30Gy、40 Gy和50 Gy时,显示有统计学意义差别(P<0.05)。在照射40Gy时,HPRT基因突变率达最高峰,其均值大于1×10-3,与照射前及其它照射累积剂量组相比,均有显著统计学意义差别(P<0.01)。随着照射剂量的进一步增加,当照射60 Gy时,HPRT基因位点突变率虽然较照射前升高,但是无统计学意义差别。从0-40 Gy,HPRT基因突变率基本呈线形上升。HPRT基因突变率与累积剂量间呈现较好的剂量-效应关系(r=0.900,P<0.05)。行直线回归分析,回归方程为Y=0.459+0.01353X。HPRT基因位点突变率与累积剂量成线性关系。 2.彗星试验中,分析淋巴细胞DNA拖尾率(计数100细胞中的拖尾细胞数),各累积剂量组与照射前相比,具有显著统计学意义差别(P<0.01)。随着照射剂量增加,在0-60Gy之间,拖尾率基本呈直线上升,在照射累积剂量为60Gy时,达最大拖尾率。进行直线相关回归分析,回归方程为。Y=12.133+0.230X,相关系数r=0.964(P<0.05),拖尾率与累积照射剂量之间成线性关系。 3.彗星试验中,尾长在各累积剂量组与照射前相比,均有显著统计学意义的差别(P<0.01)。在照射剂量累积30 Gy时,尾长均值达最大。随照射累积剂量的进一步增加,尾长稍有下降,但是仍持续在一个较高的水平,与照 天津医科大学硕士学位论文射前相比,具有显著统计学意义差别(P<0.01)。进行相关分析相关系数二0.444(P>.05)。说明尾长与累积剂量间有相关趋势,但是不成线性关系。 4.研究中两种方法分析的三个指标随剂量升高都有所改变,但是他们显示不同的敏感性。剂量相关由高到低如下:拖尾率(二0.964),HPRT基因突变率(二0.900),尾长(二0.444)。拖尾率和尾长在照射IOGy时与照射前相比即显示有显著统计学意义的差别(P<0.01);HPRT基因突变率在照射30Gy时与照射前相比才显示有统计学意义的差别(P<0.01),且在照射50Gy、60Gy时突变率由之前的上升趋势改为下降趋势。而拖尾率一直是上升趋势,尾长则倾向于迅速升高后保持高水平,变化不大。 结论:1.HPRT基因突变率在放疗后明显升高,与放疗前相比,差别具有统计学意义。随着照射累积剂量的增加,其突变率亦上升,在40Gy时达最大值,在40Gy之前,HPRT基因突变频率基本呈直线上升,剂量一效应关系良好。直线回归分析,HPRT基因突变率与照射累积剂量成线性关系。 2.拖尾率在照射后明显升高,各累积剂量组与照射前相比,均有显著统计学意义差别(P<0.01)。在照射累积60 Gy时,拖尾率达最大值。随照射累积量增加,拖尾率基本呈直线上升,剂量一效应关系良好。直线回归分析显示,拖尾率与照射累积剂量成线性关系 3.彗星试验中,尾长在照射后明显升高。各累积剂量组与照射前相比,均有显著统计学意义差别(P<0.01)。在照射累积30 Gy时,尾长达最大值。尾长与照射累积剂量间未见剂量一效应关系。 4.HPRT基因位点突变率和彗星试验用于评价放疗造成的损伤,具有较高的敏感性,彗星试验较HPRT基因位点突变率敏感,两者均呈现良好的剂量一效应关系,是两个具有应用价值的生物剂量计。