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第一部分建立曲酸脂质体和囊泡包封率的测定方法目的:建立曲酸HPLC测定方法,建立曲酸脂质体、囊泡的包封率测定方法。方法:1建立高效液相色谱法（HPLC）测定曲酸的含量,对液相条件的稳定性、重复性、精密度等进行考察。2采用微柱离心法测定曲酸脂质体包封率（Entrapment efficiency,EE）,确定离心条件,考察该方法的稳定性与重复性。3采用超速离心法测定曲酸非离子表面活性剂囊泡包封率,考察其重复性。结果:1建立了测定曲酸含量的HPLC方法,方法准确可靠,可用于计算包封率。2建立的微柱离心法可有效分离游离的曲酸和脂质体,方法精确度高,重现性好,在选定的柱高和离心条件下,脂质体的回收率能够满足包封率测定的要求。3建立的超速离心法可有效分离游离的曲酸和囊泡,方法重现性满足包封率测定的要求。第二部分曲酸脂质体制备工艺及处方优化目的:确定曲酸脂质体的最优制备工艺与处方。方法:1分别采用薄膜分散法、逆相蒸发法、醋酸钙梯度法、硫酸铵梯度法制备KA-L,以包封率为指标,选择最优的制备方法进行单因素实验。2采取单因素实验,对制备工艺、处方中的各个因素不同水平下的包封率进行考察,从中筛选出3个因素用于星点设计-效应面优化法,以包封率与载药量（Drug loading efficiency,DL）为指标,将二者统一为总评归一值（OD）,采用多元非线性模型拟合,根据OD的大小确定出最优的曲酸脂质体制备工艺、处方,预测最优的包封率与载药量,并对最佳制备方法进行验证。结果:1采用薄膜分散法、逆相蒸发法、醋酸钙梯度法、硫酸铵梯度法四种方法制备曲酸脂质体结果显示,醋酸钙梯度法制备的包封率最高。2通过对曲酸脂质体处方和制备工艺的单因素考察,确定星点设计-效应面法考察的3个因素分别为:曲酸/磷脂（m/m,X1）、胆固醇/磷脂（m/m,X2）、醋酸钙浓度（mol·L-1,X3）。通过绘制等高线图和效应面图,确定最优处方X1=0.09、X2=0.125、X3=0.15mol·L-1,通过拟合方程计算得到预测包封率为40.645%,载药量为3.078%,而实际测得包封率为:（41.19±1.071）%,载药量为:（3.064±0.029）%,与预测值偏差分别为:1.341%和-0.877%。第三部分曲酸囊泡制备工艺及处方优化目的:确定曲酸囊泡的最优制备工艺与处方。方法:1分别采用薄膜分散法、逆相蒸发法制备曲酸囊泡,以包封率为指标,选择最优的制备方法进行单因素实验。2采用单因素实验,对制备工艺、处方中的各个因素不同水平下的包封率进行考察,从中筛选3个因素用于星点设计-效应面优化法,以包封率与载药量为指标,将二者统一为总评归一值（OD）,对结果采用多元非线性模型拟合,根据OD值的大小确定最优曲酸囊泡制备工艺、处方,预测最优包封率与载药量,并对最佳制备方法进行验证。结果:1薄膜分散法、逆相蒸发法制备曲酸囊泡的结果显示,逆相蒸发法制备的曲酸囊泡的包封率最高。2通过对曲酸囊泡处方和制备工艺的单因素考察,确定了星点设计-效应面法考察的3个因素分别为:曲酸投药量（mg,X1）,胆固醇的用量（mg,X2）、司盘40的用量（mg,X3）。通过绘制等高线图和效应面图,确定最优处方X1=0.045,X2=0.20,X3=0.26,通过拟合方程计算得到预测包封率为39.32%,载药量为3.66%,而实际测得包封率为:（38.95±0.871）%,载药量为:（3.60±0.025）%,与预测值偏差分别为:-0.940%和-1.630%。第四部分曲酸脂质体及囊泡的体外透皮特性研究目的:考察曲酸脂质体、囊泡的体外经皮渗透特性,并与曲酸溶液进行比较。方法:制备最优处方的KA-L和KA-N,确定合适的接收介质。利用改良Franz透皮吸收扩散仪对曲酸溶液（KA-S）、KA-L、KA-N三种制剂的体外透皮特性进行考察,分别记录三种剂型的每小时透皮量,绘制累积透皮百分率-时间曲线,并计算24h累积透过量与皮肤滞留量,对释放数据进行模型拟合,采用滞留时间法评价KA-S、KA-L、KA-N的体外渗透特性,探究KA-S、KA-L、KA-N的体外透皮机制。结果:体外透皮结果显示,曲酸溶液（KA-S）24h的单位面积累积渗透量最大,为2.862 mg·cm-2,24h累积释放率已经达到90%,24h单位面积皮肤滞留量为0.233 mg·cm-2;KA-L的24h的单位面积累积渗透量较KA-S的少,为1.722 mg·cm-2,24h累积释放率为54%,24h单位面积皮肤滞留量为0.746 mg·cm-2;KA-N的24h的单位面积累积渗透量为2.041 mg·cm-2,24h累积释放率为71%,24h单位面积皮肤滞留量为0.534 mg·cm-2。体外经皮渗透曲线基本符合Higuchi方程,实验结果显示KA-L和KA-N相对于KA-S的24h透皮速率常数较小,表明KA-L和KA-N能够起到较好的缓释作用,其中KA-L的缓释效果最好,同时KAL和KA-N的24h皮肤滞留量相对于KA-S较大,表明两种制剂可以使曲酸更多地滞留于皮下组织中。第五部分曲酸脂质体、囊泡稳定性的初步考察目的:初步考察曲酸脂质体、囊泡的稳定性。方法:进行影响因素实验和长期稳定性实验,观察曲酸脂质体和曲酸囊泡在不同温度与光照条件下的外观改变,同时测定泄漏率,初步考察曲酸脂质体、囊泡的稳定性。结果:影响因素实验和长期稳定性实验结果表明温度与光照对脂质体和囊泡的泄漏率有一定的影响,光照对脂质体的外观产生一定影响,而长时间的贮存则会加剧曲酸脂质体和囊泡的泄漏。结论:建立的HPLC法可准确测定曲酸的含量,确立的微柱离心法和超速离心法能准确测定曲酸脂质体和囊泡的包封率。经单因素实验与星点设计-效应面法优选确定出的曲酸脂质体和囊泡的最优处方、工艺,包封率、载药量的重现性良好。体外透皮实验表明曲酸脂质体和曲酸囊泡具有较好的缓释效果,同时能够增加曲酸在皮下的滞留量。