鳕鱼皮蛋白肽修饰技术及生物活性研究

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鳕鱼Gadous macrocephaius是我国重要的海洋经济鱼种之一,年加工量可达400,000~500,000t,约可产生28,000~40,000t的鳕鱼皮,大约有95%用于加工成饲料,而仅有不到5%用于提取胶原蛋白或加工成临床医用食品。本研究以鳕鱼皮为主要研究对象,采用复合酶解法制备鳕鱼皮蛋白复合肽,并筛选出最佳钙源与其制备出鳕鱼皮复合肽螯合钙,对制得的鳕鱼皮复合肽螯合钙进行了壮骨动物实验研究:(1)复合酶解法的最佳条件为:木瓜蛋白酶在酶浓度0.6%、底物浓度35%、酶解温度70℃、pH6.0的条件下酶解3h后,加入风味酶在酶浓度0.4%、底物浓度30%、酶解温度60℃、pH6.5的条件下酶解3h,水解度可达25.87%。对酶解产物进行分子量测定得到其分子量是呈连续分布,在10kDa至30kDa之间,说明鳕鱼皮蛋白已经被酶解为多肽。(2)对鳕鱼皮复合肽的最佳脱腥脱苦方法为粉末活性炭与酵母粉联合使用,条件是:先添加1.5%的酵母粉、在pH值5.0、温度35℃的条件下,发酵90min,然后添加2.0%的粉末状活性炭,在pH值5.0、温度40℃的条件下作用70min,在该条件下得到的酶解液感官评分达到9.0,蛋白质回收率为91.5%。用联合方法对酶解液进行脱腥脱苦处理后,多肽和游离氨基酸的损失分别为4.68%和3.78%。(3)最终确定无水CaCl2为螯合反应的最佳钙源,鳕鱼皮复合肽螯合钙的最佳制备条件为:配位比0.3:3、pH值7.0、温度25℃、时间20min。对产物进行了紫外扫描和红外光谱扫描,确定鳕鱼皮复合肽螯合钙是一种不同于鳕鱼皮复合肽的新物质。(4)动物实验结果表明鳕鱼皮多肽螯合钙有显著增加小鼠骨密度的功效,并且效果好于碳酸钙,是一种优质的补钙制剂。
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