【摘 要】
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目的:复制高脂饮食诱导的NAFLD小鼠模型,观察参苓白术散对NAFLD肝脏线粒体膜功能、线粒体呼吸状态、腺苷酸含量及线粒体能量代谢相关UCP2/AMPK/IF1信号通路蛋白的调控作用,研究参苓白术散治疗NAFLD的作用机制。方法:将96只SPF级C57BL/6小鼠（20±2g）随机分为6组,每组16只。正常组给予普通饲料喂养,其他组给予高脂饲料喂养。4-10周末正常组和模型组予以生理盐水灌胃（10
【基金项目】
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国家自然科学基金项目支持（81860812）；
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目的:复制高脂饮食诱导的NAFLD小鼠模型,观察参苓白术散对NAFLD肝脏线粒体膜功能、线粒体呼吸状态、腺苷酸含量及线粒体能量代谢相关UCP2/AMPK/IF1信号通路蛋白的调控作用,研究参苓白术散治疗NAFLD的作用机制。方法:将96只SPF级C57BL/6小鼠（20±2g）随机分为6组,每组16只。正常组给予普通饲料喂养,其他组给予高脂饲料喂养。4-10周末正常组和模型组予以生理盐水灌胃（100ml/kg）,二甲组予以二甲双胍灌胃（0.468g/kg）,参低、中、高组分别以参苓白术散临床等效量1、2、4倍量进行灌胃（2.34g/kg、4.68g/kg、9.36g/kg）。分别在8周末和10周末取材,每组每次取8只,取血进行血清生化检测,取肝分别进行病理、线粒体膜通透性、线粒体呼吸状态、腺苷酸含量及线粒体UCP2、AMPK、IF1蛋白表达量的检测。结果:1.参苓白术散对高脂饮食诱导NAFLD小鼠的治疗作用:8周末及10周末模型组小鼠体重较正常组显著增加,模型组肝脏颜色变黄,肝体比增加,各药物组均可降低NAFLD小鼠体重及肝体比,数值处于正常组与模型组之间。HE染色结果显示,模型组肝索排列紊乱,油红O染色结果显示肝细胞中存在脂滴,超过细胞体积2/3,参苓白术散各剂量组的肝索排列及肝小叶结构较模型组有所恢复,肝细胞脂肪变性程度和脂肪颗粒沉积数量明显减少。生化指标显示,模型组ALT、AST、TBIL、FBG、TC、TG、LDL-C较正常组均降低,HDL-C增高（P<0.05）。参苓白术散各组ALT、AST、TBIL、FBG、TC、TG、LDL-C均高于模型组,HDL-C低于模型组（P<0.05）。2.线粒体膜通透性及氧化磷酸化功能相关指标检测结果:8周末及10周末模型组肝脏线粒体对高钙溶液敏感度降低,膜电位下降;总蛋白含量降低,ST4增高,ST3、RCR、P/O、OPR降低,腺苷酸含量降低（P<0.01）。与模型组相比,其他各用药组8周末与10周末肝脏线粒体对高钙溶液敏感度增高,膜电位有所恢复;总蛋白含量增高,ST4下降,ST3、RCR、P/O、OPR升高（P<0.01）;8周末参低组、参中组ATP明显升高（P<0.01）,10周末二甲组ATP升高（P<0.05）。3.肝脏中UCP2、AMPK、IF1检测结果:与正常组相比,8周末及10周末模型组UCP2显著增高,AMPK及IF1显著降低（P<0.01）;与模型组相比,8周末及10周末参低组、参中组UCP2蛋白含量均降低（P<0.05）,二甲组显著降低（P<0.01）;8周末及10周末二甲组、参高组AMPK含量均显著升高（P<0.01）;8周末参高组IF1含量升高（P<0.05）,10周末参低组、参中组、参高组显著升高（P<0.01）。结论:1.健脾经典方参苓白术散可减轻高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂质沉积,起到健脾疏肝的作用;2.参苓白术散可改善非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏线粒体膜通透性、呼吸状态、氧化磷酸化效率,增加肝脏ATP含量,并可调节肝脏线粒体能量代谢的UCP2/AMPK/IF1信号通路,影响线粒体功能,起到益气疏肝的作用。
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