目的：观察高糖环境下大鼠肾小球系腆细胞基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制物TIMP-1的表达，进一步探索糖尿病肾病中肾小球细胞外基质积聚的机制。 方法：大鼠肾小球系膜细胞体外培养体系建立后，分别用高糖和正常糖培养基培养12，24，48，72小时，用羊抗大鼠MMP-9、TIMP-1多克隆抗体和免抗大鼠TGF-β₁多克隆抗体进行免疫细胞化学和Western印迹等实验，观察培养不同时期的肾小球系膜细胞表达MMP-9,TIMP-1和TGF-β₁的情况。用小鼠抗大鼠IV型胶原单克隆抗体进行ELISA实验，检测培养不同时期的肾小球系膜细胞分泌IV型胶原的情况。 结果：免疫细胞化学结果显示高糖和正常糖培养的肾小球系膜细胞在培养的12，24，48，72小时均有MMP-9，TIMP-1和TGF-β₁的表达，且阳性信号均出现在胞浆中，胞核中未见阳性信号。高糖组各时间点的TGF-β₁的表达均强于相应的正常糖组；第12h未观察到TIMP-1和MMP-9的表达的改变，从第24—72h，高糖组MMP-9的表达弱于正常糖组，TIMP-1的表达则强于正常糖组。Western印迹实验显示，在正常糖浓度条件下培养的系膜细胞都行MMP-9、TIMP-1及 中文摘要＊＊F儿蛋白白杉达爹 j杉达贡较走太多 f【D！龟IM封 而波动。高糖纠MMP－9o人达量从24h厂女O成少，4811和72h【 V低丁上常柳ZI．爹 J＿L呈工逐淖 卜早亿势萝 而TIMP一1的变化则川反，内枫纠＿衣达切－从二41工)I‘始增加，48h和刀1飞u V而丁小常柠【作卜口丁GP书且＊ 儿士八片时问【士储队人著而厂卜常W泪1．口＊GFD丸TIM 卜1r 人丛均T＊．逐渐增向。巳势。TGFp的变化；’二J二 MMP－9干 TIMP－1的变f 口；大柠 n1二述效J ＊ 培作］I乙J＊ 辽K逐渐增似昏 卜且 ＊G＊；山变化’；’刁’MM＊9干TIM＊！的f化。ELISA 人沾木亩林主U刮吾大钠纠和．卜不柳一l系附细胞分泌 IV cj 冰的！d著芹异。 结论：抓床呐 肾炳＊ 多 小球细月 外从少 的川聚一仪足「I］丁E C M A成增多，ECM降解似少山；匡巾尘作川。高糖培养不小厂f乔的系腆细胞MM卜9 大丛似捐，nM卜1衣达士 坝，捉小帖床刁J扣小且，，大＊枫刁卜刚勺ECM降角减少＊l自足通过影向系吸 细胞MMPS／厂MPS山衣达实现的。TGFpJI＜ fJ丁叫jU MMPS人丛，历VTIMPS衣达n fi川J。而枫环境卜爪 乔n 系收 细胞TGFD人达增强，L川现在MMPg＊ 叫 变化之卜 卅小南柳＊lie山M M PS／TIMPS 山 变化I丁能 Um过上)］J＊G＊p山分泌介vn。