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罗非昔布和塞来昔布是非甾体类抗炎药的两种,可以特异性的抑制环氧化酶—2（cyclooxygenase—2,Cox—2）,阻止花生四烯酸（arachidonic acid,AA）转化成前列腺素E2（postaglandins E2, PGE2）。除了具有抗炎镇痛的作用之外,最近的研究发现它们还具有抗肿瘤和预防肿瘤的作用。流行病学及动物实验研究证明,环氧化酶—2抑制剂可降低肿瘤的发生率并预防肿瘤的形成。而且研究发现,使用环氧化酶—2抑制剂可以明显抑制肺癌的复发和全身的转移。本实验将两种Cox—2抑制剂（罗非昔布、塞来昔布）作用于三种肿瘤细胞系,观察细胞的增殖变化,并通过流式细胞仪检测凋亡率,对这种药物的抑瘤机制进行探讨。 目的:通过Cox—2抑制剂对骨肉瘤、乳腺癌、肺癌细胞系的抗肿瘤效果的研究以及两种Cox—2抑制剂对三种肿瘤细胞周期的影响以及凋亡率的比较,旨在探讨Cox-2抑制剂是否有抑制肿瘤细胞增殖的作用,两种药物的作用之间有无差异,同时对其作用机制进行初步的研究,为其临床应用提供理论依据。 方法:1.细胞培养HOS-8603细胞培养于含体积分数为10%的胎牛血清的DMEM液中,MDA-MB-435S和A549细胞培养于含体积分数为10%的新生小牛血清的RPMI 1640培养基中,两种培养基中含有100u/ml的青霉素和10mg/ml的链霉素。置于体积分数为5%的CO2饱和湿度、37℃孵箱中贴壁培养。2.MTT法检测环氧化酶抑制剂对三种细胞的增殖抑制三种细胞植入96孔细胞培养板,待贴壁后分别加入不同浓度的塞来昔布和罗非昔布,继续培养36h、60h和84h,结束前4—6h,加入10μl含5mg/mlMTT溶液,全自动荧光酶标仪570nm测定吸光度。3.细胞周期及凋亡测定 药物处理84小时后收集细胞,治疗组和控制组细胞通过传代的方法从培养基中提取出来,70%的冰乙醇固定。碘化丙啶处理60分钟,上流式细胞仪分析细胞周期及凋亡。 结果:Cox—2抑制剂能够抑制三种肿瘤细胞的生长。随着浓度的增加抑制作用不断增强,处理组和阴性对照组存在显著性差异。塞来昔布抑制效果强于罗非昔布。当药物浓度为2μM和20μM时,在36,60和84小时塞来昔布、罗非昔布