论文部分内容阅读
1.不同提取方法对红芪多糖体外抗氧化活性的影响目的：研究不同提取方法所得红芪多糖的体外抗氧化活性,从而筛选出获得体外抗氧化活性高的多糖的提取方法。方法：红芪干燥根经预处理后,采用超声辅助、微波辅助和常规热水浸提法对其多糖进行提取,得到HPS-C、HPS-M、HPS-H。其后对样品进行红外光谱表征的扫描,测定分子量,清除DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除率和还原力。结果：(1)红外光谱分析表明,三种方法得到的HPS-M、HPS-C、HPS-H在3418cm-1、2935 cm-1、1618 cm-1、1083cm-1都有吸收峰,此为多糖特征吸收峰,表明HPS-M、HPS-C、HPS-H均为多糖。(2)体外抗氧化活性测定实验表明,HPS-M、HPS-C、HPS-H清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基的能力依次减小,且HPS-M的体外抗氧化活性要高于HPS-C、HPS-H。同时,三者的还原力测定也表明,HPS-M>HPS-C＞HPS-H。结论：出于对红芪多糖生物学活性与提取效率的考虑,未来可选择微波辅助法做为红芪多糖的提取方法。2.红芪多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗免疫衰老作用的研究目的：建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,对红芪多糖的抗免疫衰老作用进行研究。方法：使用清洁级昆明种小鼠采取D-半乳糖腹腔注射的方法构建亚急性衰老小鼠模型,分为6组：空白组(生理盐水组),模型组(D-半乳糖致衰老组),阳性对照组(维生素E组),红芪多糖(HPS)高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组小鼠连续腹腔注射D-半乳糖(120mg/kg),空白组灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃维生素E溶液(5Omg/kg),红芪多糖高、中、低剂量组分别灌胃三个浓度水溶液(高剂量组20Omg/kg、中剂量组100mg/kg、低剂量组50mg/kg)。以上操作连续进行42天之后,计算胸腺指数和脾脏指数,使用MTT法测定T淋巴细胞增殖能力,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群水平,取小鼠血清用ELISA法测定IL-2、IFN-γ、IL-4、TNF-α的含量。结果：(1)模型组小鼠明显表现出衰老体征,各项实验数据显示：脏器指数、T淋巴细胞增殖能力、T淋巴细胞亚群测定、血清IL-2、IFN-γ、IL-4、TNF-α均与空白组存在明显差异。(2)HPS高、中、低剂量组均可提高小鼠胸腺指数和脾脏指数,对衰老动物模型免疫器官萎缩有一定的抑制作用,还能够恢复T淋巴细胞的增殖能力,不同程度的提高了小鼠CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞百分比,对CD3+CD28+T细胞升高作用明显,对T淋巴细胞具有调节作用。(3)HPS高、中、低剂量组小鼠血清细胞因子IL-2、、IFN-γIL-4水平升高明显,TNF-α在血清中表达降低。结论：HPS高、中、低剂量组均可升高亚急性衰老小鼠胸腺指数和脾脏指数,对T淋巴细胞具有调节作用,HPS具有一定的抗免疫衰老作用,可通过调节T淋巴细胞作用来延缓衰老,能有效改善亚急性衰老小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。HPS三个剂量组之间,高、中剂量组作用明显。