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巨噬细胞至少可以被分为两种类型：M1型和M2型,即经典活化型巨噬细胞和替代活化型巨噬细胞。M1型巨噬细胞有很强的杀菌和抗原提呈能力,M2型巨噬细胞具有修复损伤、促进血管形成以及组织重构的作用。肿瘤中高度浸润的巨噬细胞称为肿瘤相关巨噬细胞(Tumor associated macrophage, TAM)。TAM是一类高度异质性的细胞群体,包含介于M1到M2二者之间的各个类型。近几年来,越来越多的研究表明TAM具有支持肿瘤细胞的生长、侵袭、转移等一系列促进肿瘤发展的功能。目前,M1和M2的比例被用于衡量肿瘤组织中巨噬细胞对肿瘤细胞的抑制能力。本研究基于本实验室前期小鼠乳腺癌TAM分化过程中microRNA表达谱芯片的结果,发现miR-146a在TAM中下调最明显。目前已有报道称miR-146a负反馈调节TLR (Toll-like receptor)信号通路中炎症因子的表达,我们实验室的前期实验结果也证实了这一观点。然而,出乎意料的是,作为一个经典的炎症抑制因子,miR-146a在TAM中的表达量反而下调。这种矛盾提示,在TAM中niR-146a受到了特殊方式的调控,更暗示了在免疫调节中miR-146a可能具有更复杂的功能。本研究首先在小鼠4T1移植瘤模型中验证了miRNA表达谱芯片的结果,而且在人乳腺癌、胃癌、结肠癌浸润的TAM中,niR-146a的表达呈现下调趋势,与小鼠模型中获得的结果一致。分析miR-146a在TAM中表达下调的原因,发现肿瘤细胞培养上清及肿瘤微环境中存在的重要细胞因子均不能引起巨噬细胞中miR-146a表达的下调。而在临床病人标本中发现乳腺癌TAM中NF-κB p50亚基表达升高。通过ChIP实验和过表达实验证实p50能够结合miR-146a启动子,并参与对miR-146a的负调控。为了进一步了解miR-146a在TAM中的功能,将化学合成的miR-146a inhibitor转染小鼠腹腔巨噬细胞后,再分别用LPS和IL-4处理。发现抑制腹腔巨噬细胞中miR-146a的表达能够促进LPS刺激下IL-1b、IL-6和iNOS的表达,抑制IL-4诱导的M2型巨噬细胞标志分子IL-10、Argl、PDGF的表达,但对某些M2型巨噬细胞标志分子如M1、Fizz, CCL17的表达没有影响。小鼠体内移植瘤实验表明,4T1与转染miR-146a antagomir的小鼠腹腔巨噬细胞共注射时,其生长明显比与对照组减慢,提示TAM中的miR-146a下调能够抑制肿瘤生长,即对肿瘤生长起负调控作用。综上所述,本研究发现,在人和小鼠的乳腺癌TAM中,miR-146a显著下调。其表达下调可能是由TAM中表达升高的NF-κB p50亚基引起的。在巨噬细胞中抑制miR-146a表达能促进巨噬细胞M1型极化,部分抑制M2型极化并抑制肿瘤生长,提示miR-146a在TAM中对肿瘤生长起负反馈调节作用。本论文为microRNA在TAM分化中的作用、分子机制以及肿瘤治疗研究提供了新的资料。