银杏根皮资源化学研究

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本论文共分四章内容。一、文献研究系统地总结了银杏的起源、分布、生物学特征、品种分类、本草记载、化学成分、药理作用等。二、银杏根皮资源化学成分研究基于对银杏资源的综合开发利用,采用硅胶柱层析等色谱技术对银杏根皮所含化学成分进行分离、纯化。并通过现代波谱学方法技术鉴定了其中的20个化合物,其中联苯类1个,为4-(3,4-dimethoxyxhenyl)-1,2-dimethoxybenzene(1);木脂素类1个,为(+)-芝麻素(2);脂肪酸类4个,分别为:棕榈酸(3)、硬脂酸(4)、山嵛酸(5)、木蜡酸(6);脂肪醇类1个,为二十七烷醇(7);甾体类2个,分别为:β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9);黄酮类5个,分别为:芫花素(10)、芹菜素(11)、金松双黄酮(12)、银杏素(13)、异银杏素(14);萜内酯类4个,分别为白果内酯(15)、银杏内酯A(16)、银杏内酯B(17)、银杏内酯C(18);糖类2个,分别为D-葡萄糖(19)、蔗糖(20)。三、银杏资源化学评价研究(一)银杏特征性成分分析评价研究采用UPLC-TQ-MS/MS测定银杏不同部位特征性成分:黄酮类、萜内酯类和银杏酸类。萜内酯和银杏酸类成分普遍存在于银杏样品中,但是各自成分含量差异较大。萜内酯含量由高到低的顺序为:根>叶>茎>枝,皮部>>木部。银杏酸含量由高到低的顺序为:叶>枝>>根>茎。黄酮类成分,则主要集中于叶中。(二)多糖类成分资源化学评价组成银杏不同部位的多糖中中性多糖与酸性多糖的比为4.87:1~2.12:1之间,可见中性多糖为银杏不同部位中总多糖的重要组成部分。多糖平均含量呈现出外(韧皮部)多内(木质部)少,两边(根和叶)多中间(茎和枝)少的趋势,差异主要来源于中性多糖。(三)氨基酸类成分资源化学评价采用HILIC-UPLC-TQ-MS/MS分析方法用于银杏蛋白氨基酸类成分的分析,测定的结果显示:蛋白氨基酸总含量的变化范围为317.8~6397.18 μg·g-1,银杏中蛋白氨基酸含量普遍偏低,但个别氨基酸含量较高,其中脯氨酸的含量,更是占到了银杏叶总蛋白氨基酸的一半。(四)无机元素成分资源化学评价采用ICP-AES法,对不同部位银杏中29种无机元素含量及其分布规律进行了研究。结果显示:银杏各样品中常量元素中Ca、Mg、K和P含量丰富,微量元素中以Al、Fe、Si含量较为丰富,Mg具有影响体内脂质过氧化,保护细胞膜、维持线粒体功能等作用;K对维护心脏的正常功能及细胞的新陈代谢中起重要作用。四、银杏根皮生物活性初步评价(一)急性毒性试验通过观察小鼠灌服给予不同剂量银杏根皮的急性毒性实验,为后期试验的剂量设计及临床用药安全提供参考。(二)银杏根皮对乙二醇复制肾结石模型的影响选择乙二醇复制大鼠肾结石模型,对银杏根皮临床不同配伍用药进行评价。以血清钙含量及血流变等为考察指标,研究临床银杏根皮配伍冰糖对肾结石的影响。结果显示,采用乙二醇复制肾结石模型造模后,大鼠血浆粘度会有不同程度的增加,单独使用冰糖时,血浆粘度会加重,给予银杏根皮会使血浆粘度恢复至正常水平。对于其功效物质基础还有待于进一步研究。(三)银杏中单体类成分对肿瘤细胞增殖作用的研究采用MTT法,对从银杏根皮中分离得到的单体类成分,进行体外抑制肾上腺嗜铬细胞瘤(PC-12)细胞、人乳腺癌(MCF-7)细胞、肝癌(Hep3B)细胞增殖的影响。结果显示,联苯4-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,2-dimethoxybenzene对人乳腺癌细胞增殖有较强的抑制作用,呈量效关系,且专属性较强。提示该化学成分可以作为肿瘤细胞增殖抑制剂,或作为抗肿瘤药物及其先导化合物。
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