益生菌抑制炎症性肠病肠道炎症反应的研究

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第一部分 益生菌对HT29细胞TNF-α所诱导的IL-8分泌的调节作用 研究背景与目的:肠上皮细胞是肠粘膜免疫屏障的重要组成部分,同时参与肠粘膜天然免疫。正常情况下,肠道正常菌群附着在肠上皮细胞表面,调节上皮细胞的生理功能。肠道炎症时,肠道菌群失调,肠上皮细胞功能紊乱并分泌炎症细胞因子,诱发肠道异常免疫反应;实验研究证实补充益生菌,能恢复正常菌群对上皮细胞的粘附及功能调节作用,并抑制肠道异常免疫反应。本实验用体外培养的与肠上皮细胞生物学特性相似的HT29细胞,与益生菌共培养,用TNF-α刺激细胞以模拟肠道炎症环境,以探讨益生菌对炎症状态时肠上皮细胞分泌促炎细胞因子的调节作用。 方法:结肠癌上皮细胞系H29细胞经培养后分为4组:对照组(C)、TNF-α刺激组(T)、双歧杆菌组(B)、乳酸杆菌组(L)。厌氧培养的双歧杆菌和乳酸杆菌分别经培养液重悬,浓度调为1×10~8cfu/ml,并分别加入各组每孔。1h后,TNF-α(10ng/ml)加入T、B、L组的每孔中。3小时后,收集上清,ELISA法测IL-8;提取细胞核蛋白、RNA,经Western
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