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背景肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)作为原发性肝癌(Primary Liver Cancer,PLC)中最常见的病理类型,也是世界前三位的癌症致死病因,现阶段手术仍是HCC治疗的主要手段,虽然部分患者获得满意的疗效,但术后70%的5年复发率以及不足50%的5年总生存率依然难以攻克;由于HCC发病隐匿,进展迅速,许多患者就诊时已失去手术机会,如今,肝动脉栓塞化疗(Transcatheter arterial chemoembolization,TACE)、分子靶向治疗、生物治疗、免疫治疗等方式在中晚期肝癌中取得部分效果,但HCC恶性程度高,易转移扩散,依然为国民生命健康带来沉重负担。真核细胞的生长、发育、成熟、分泌都伴随着体内蛋白的转运与传导,人体细胞器之间的精密活动与调节在生命活动中发挥重要作用,也是一直以来的研究热点,细胞器通过包吞与包吐作用将囊泡运送到指定的位点,而囊泡的形成、转运、粘附、精确输送等环节涉及多种蛋白参与,Rab GTPases就是其中一种。已有研究证实,Rab蛋白的结构突变、区域缺失将导致蛋白的错配,参与肿瘤等疾病的发生。Rab1A是Rab蛋白家族的一员,其锚定在高尔基体与内质网膜上,控制两者之间的囊泡转运,Rab1A的失调将导致内质网内蛋白质的累积,诱导内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)信号通路,即折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR),UPR协调蛋白质的合成与降解、分子伴侣的表达及细胞周期进程与细胞凋亡。现已证实Rab1A的异常表达涉及多种疾病发生,如帕金森病,阿司匹林加剧的呼吸系统疾病等;同时Rab1A也涉及mTORC1通路的调节,参与结肠癌、前列腺癌等恶性肿瘤的发展。Rab31是Rab蛋白家族的另一成员,最先从人类黑素细胞中克隆出来(随后又从人类血小板中克隆出),大约由194个氨基酸组成,Rab31在调控早期内涵体-晚期内涵体的运输中起作用,尤其参与表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的调控,已有实验证实Rab31的高表达促进乳腺癌细胞的增殖,还参与卵巢癌、胶质母细胞瘤的进展,在多数肿瘤中表现出恶性的侵袭功能,但其影响肿瘤细胞凋亡与增殖的机制仍在探讨中。Rab1A与Rab31均是囊泡运输的调节蛋白,参与高尔基体与内质网间的物质转运,在肿瘤中的研究还处于初级阶段;且有研究证实两者也参与细胞的自噬与衰老,而细胞的自噬作用也是肿瘤发展的重要机制。因此进一步肯定两者的生物学作用将具有重要意义,本实验通过检测两指标在HCC上的表达证明其参与肿瘤发展的意义。目的检测Rab1A与Rab31两种蛋白在HCC组织上的表达情况,探讨两者与HCC患者临床指标的相关性及术后预后的关系。方法收集郑州大学第一附属医院2011-2012年期间行根治性肝癌切除的标本62例,术后病理结果均证实为HCC,并收集相应癌旁组织及正常组织标本,通过免疫组化法(SP法)检测Rab1A与Rab31在肝癌组织及癌旁组织、正常肝组织中的表达,对比不同组织间表达的差异性;分析两者与62例HCC患者临床及病理特征的关系;对所有患者进行远期随访,并记录患者术后总生存时间,对患者生存资料进行多因素与单因素分析,并通过生存分析证明两指标与HCC患者术后预后的关系。结果1、通过免疫组化法对比了原发病灶、癌旁组织及正常肝组织的蛋白表达情况,Rab1A及Rab31在HCC组织中的阳性表达量(93.55%,96.77%)均高于癌旁组织(48.39%,67.74%)与正常组织(15%,5%)的阳性表达量,其差异具有统计学意义(P<0.001);2、分析两指标与62例患者临床特征关系发现,Rab1A的表达与肿瘤的TNM分期、是否合并门脉癌栓、是否合并肝硬化、是否合并血管侵犯、肿瘤的分化程度、肿瘤直径、血清甲胎蛋白(AFP)水平存在显著关联(P<0.005);而Rab31的表达与患者的Child分级、BCLC分期、TNM分期、是否合并肝硬化、肿瘤是否合并血管侵犯、肿瘤是否多发存在显著关联(P<0.005);统计分析未见两指标表达之间存在明显关联(P=0.149);3、62例患者单因素分析发现肿瘤的分期、合并肝硬化、合并血管侵犯、病理低分化等因素影响患者的术后生存期(P<0.005),而Rab1A与Rab31的相对高表达也是HCC术后总生存的危险因素(P=0.026,P<0.001)。生存曲线可见Rab1A与Rab31高表达的HCC患者术后总存活率均低于相应低表达患者(P<0.005)。结论1、Rab1A与Rab31均集中表达于HCC组织中,Rab1A的高表达与肿瘤的TNM分期、门脉癌栓、肝硬化等相关;Rab31的高表达与患者的Child分级、BCLC分期、肿瘤多发等因素相关;2、高表达Rab1A与Rab31的患者术后表现出不佳预后,总生存时间明显缩短,针对两者的靶向研究可能为HCC的治疗提供新方向。