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血管性痴呆(vasculardementia,VD)是指由缺血性或出血性中风或缺血缺氧性脑损害导致的以认知损害为特征的慢性进行性疾病。随着我国老龄化社会的到来,脑血管病发病率升高,血管性痴呆的发病率逐年上升,已严重威胁中老年人的健康和生命。近年来,许多中医学者发掘中医传统疗法治疗血管性痴呆的有效方药,在血管性痴呆的治疗上取得了较好的疗效,但对其治疗机理尚未完全阐明,阻碍了中药在临床的推广运用。因此,积极开展中医药治疗血管性痴呆的研究具有重要的现实意义。
导师在长期临床和实验研究的基础上,结合现代中医对血管性痴呆的认识和研究,提出血管性痴呆发病急性期或波动期痰瘀互结、热毒为甚的病理关键,采用清毒活血化瘀为基本治法治疗。本研究以清毒活血化痰为大法设立双根清脑颗粒(ShuanggenQinnaoGranules,SG)干预血管性痴呆模型大鼠,取得了较好疗效。本文从理论和实验两方面探讨清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的机理。
理论研究运用中医理论探讨血管性痴呆的发病部位,病因病机、治则治法,提出痰瘀阻滞日久,化热化毒,损伤脑髓是血管性痴呆发病急性期或波动期的病理关键,说明清毒活血化痰法是此期的治疗大法,并对双根清脑颗粒的组方依据、方解及治疗机理进行探讨。
实验研究分为整体实验和离体实验两部分,从行为学、形态学、生化学、细胞学、分子水平探讨血管性痴呆发病急性期“痰、瘀、毒”的病理关键及清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的现代药理学机制。
整体实验研究
采用TTC染色计算血管性痴呆模型大鼠脑梗死体积,结果表明:双根清脑颗粒各组的脑梗死体积明显小于血管性痴呆模型大鼠(P＜0.05,P＜0.01),尤其是中、小剂量显著(P＜0.01)。
采用Morris水迷宫观察血管性痴呆模型大鼠空间分辨和学习记忆能力,与模型组相比,双根清脑颗粒各组大鼠隐匿平台获得实验时间缩短,每分钟搜索到平台的次数增多,且有统计学意义(P＜0.05)。双根清脑颗粒可提高血清SOD活力及SOD/MDA的比值(P＜0.01),降低血清MDA、NO的含量及NOS活性(P＜0.05、P＜0.01),从而减轻氧自由基对脑组织的损伤。
采用免疫组织化学法发现:双根清脑颗粒中、低剂量组BrdU、DCX、BrdU/DCX,三者阳性细胞数比模型组明显增多(P＜0.05,P＜0.01);模型大鼠脑内毒性产物(血管内皮细胞ICAM-1、海马区nNOS阳性神经元)增高,但双根清脑颗粒各组ICAM-1的表达及nNOS阳性神经元少于模型组(P＜0.05,P＜0.01)。
采用Westerblot测定发现模型大鼠海马nNOS蛋白表达较强,双根清脑颗粒中、低剂量组nNOS的表达量显著减少(P＜0.05)。离体实验研究
采用MTT法测定缺氧状态神经干细胞(NSCs)的活性,结果表明双根清脑颗粒各组OD值都高于假手术组,尤其是中剂量显著(P＜0.05),表明双根清脑颗粒药物血清能促进神经干细胞的活。
采用Westerblot法测定缺氧状态下NSCs中nNOS、DCX蛋白的结果表明,双根清脑颗粒各组DCX蛋白量均高于模型组,但无显著性差异(P＞0.05),而nNOS含量均增高,中、高剂量组显著(P＜0.01),表明双根清脑颗粒能促进缺氧时NSCs的增殖和分化,提高nNOS对NSCs的保护作用。
结论:血管性痴呆发病急性期或波动期的基本病机特点是痰瘀互阻,热毒内盛;清毒活血化痰是治疗血管性痴呆的基本大法。双根清脑颗粒可改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力,清除“毒”性产物,促进神经干细胞的增殖,对脑组织具有保护作用。