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背景和目的：多形性胶质母细胞瘤(GBM)是最常见、最致命的颅内肿瘤,过去10年患者的中位生存时间只有1年。研究发现,GBM对诱导凋亡的治疗耐药,但是对诱导自噬的治疗较少耐药。因此,GBM的治疗应主要针对诱导自噬。替莫唑胺(TMZ)是目前对GBM最有效的细胞毒药物,主要诱导自噬性细胞死亡。然而,目前TMZ的疗效也不理想,这与GBM的多药耐药性紧密相关。因此,如何解决耐药性的问题异常关键,而在其中如何增强TMZ诱导的自噬作用进而提高化疗效果成为目前联合化疗研究的重点之一。研究发现GBM和氧化应激密切相关。氧化应激影响到许多信号转导通路,也可以诱导自噬。其中,Nrf2/Keap1信号通路是主要的抗氧化应激通路,Nrf2是一个重要的保护性转录因子,与肿瘤的多药耐药性相关。然而,Nrf2和自噬之间的关系还不是很清楚。因此,本研究的目的是明确Nrf2对TMZ诱导U251细胞的自噬的影响。材料和方法：通常条件下培养人源神经胶质母细胞瘤U251细胞,构建Si-Nrf2、pEGFP-Nrf2质粒并按照说明书进行Lipofectamine2000介导的瞬时转染,分为5组：脂质体试剂(Lipo)组,两个阴性对照(pEGFP-control, Si-control)组,质粒下调(Si-Nrf2)组,质粒上调(pEGFP-Nrf2)组。转染48h后蛋白质印迹(western blot)验证Nrf2转染效率,同时电镜观察自噬相关结构,western blot、吖啶橙(AO)染色流式细胞术定量检测基础自噬水平的改变。转染48h的细胞加100μ M的TMZ作用3d, CCK-8测各组细胞生存活性,western blot、AO染色流式细胞术定量检测自噬水平的改变。结果：1.转染48h后,在U251-Si-Nrf2组,Nrf2蛋白水平显著下降,LC3B-Ⅱ蛋白表达水平显著增高,白噬泡和酸性囊泡结构明显增多。2. TMZ(100μM)处理3d后, U251-Si-Nrf2组的细胞生存能力明显降低,LC3B-Ⅱ蛋白表达水平和酸性囊泡结构也明显增多。结论：在U251细胞中,下调Nrf2可以增强TMZ诱导的自噬水平。