bFGF-PLGA缓释微球促进扩张皮瓣远端成活的实验研究

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目的:通过制作碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物缓释微球(basicfibroblastgrowthfactor-polylactide-co-glycolidesustainedreleasemicrospheres,bFGF-PLGA-MS),观察其对家兔背部扩张皮瓣远端成活的影响。方法:选取健康的、体重1.6~2.1千克的家兔24只,不限制性别,称重后随机分为3组(n=8),分别为生理盐水+空白微球组、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)+空白微球组、bFGF-PLGA-MS组。术前24小时各组均予以背部皮肤处备皮,并消毒后实施扩张器植入术(Ⅰ期),术中通过注水壶向扩张器中注入6ml生理盐水。待家兔一般情况稳定后1周,每隔三日重复向扩张器内注入生理盐水6ml,共8次,注入生理盐水量为48ml。注水完成后,第14天开始予以实施扩张皮瓣成型术(Ⅱ期)。术前设计观察皮瓣,制备成以髂嵴连线为蒂的2cm×8cm的矩形皮瓣。并对所有皮瓣实施药物注射,注射部位为拟扩张区域,注射点为每隔2cm,按皮瓣面积选取15个注射点,每注射点0.1ml。bFGF-PLGA-MS组的皮瓣予以注射含bFGF-PLGA-MS溶液;bFGF+空白微球组予以注射空白微球与bFGF悬浊液溶液,空白组予以注射等量空白微球和生理盐水替代。皮瓣成形术后12天,计算皮瓣成活面积,并将家兔处死后,取皮瓣进行石蜡包埋切片、HE染色观察皮瓣的病理变化;运用免疫组化的方法检测CD34+表达差异,结合明胶氧化铅灌注法观察术后皮瓣的微血管密度。结果:1、术后12天,bFGF-PLGA-MS组、bFGF+空白微球组、空白微球+生理盐水组的皮瓣面积成活率分别约为84.94±5.14%、62.72±7.12%、59.87±6.74%。bFGF-PLGA-MS组成活率明显高于bFGF+空白微球组和生理盐水+空白微球组,统计学意义(P<0.05)。bFGF+空白微球组与空白微球生理盐水组比较,无统计学意义(P>0.05)。2、bFGF-PLGA-MS组的皮瓣HE染色示:扩张皮瓣远侧端全层坏死,伴有明显的炎症反应,该部位细胞核浓缩、破裂;细胞萎缩、变小。而皮瓣存活的部分存在一定程度水肿,其表皮变薄,伴大面积肉芽增生,及大量新生毛细血管形成。bFGF+空白微球组和NS+空白微球组,坏死的皮瓣表现相同,但存活的皮瓣中肉芽组织无明显增生,其新生血管增生不明显。bFGF-PLGA-MS组的肉芽组织增生情况和毛细血管增生情况与bFGF+空白微球组和NS+空白微球组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但bFGF+空白微球组与NS+空白微球组比较,差异无明显统计学意义(P>0.05)。3、与bFGF+空白微球组和NS+空白微球组相比,bFGF–PLGA-MS组的CD34+表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。而其在bFGF+空白微球组和NS+空白微球组的表达不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。4、bFGF–PLGA-MS组、bFGF+空白微球组及NS+空白微球组三组皮瓣平均血管数目分别为(37.38±5.90)、(25.75±5.31)、(24.13±4.76)个/cm2,bFGF–PLGA-MS组有大量的微血管生成,与bFGF+空白微球组、NS+空白微球组的平均血管数目明显增多,且微血管的吻合支明显多于bFGF+空白微球组、NS+空白微球组,差异均有统计学意义(P<0.05)。bFGF+空白微球组及NS+空白微球组血管数目增加不明显,且吻合支较少,其两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:局部注射碱性成纤维细胞生长因子缓释微球能够促进家兔背部扩张皮瓣皮下微血管增生,提高超长扩张皮瓣成活面积。
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