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目的: 探讨乳凝集素通过MAPK信号转导通路对脐带血单核细胞来源的未成熟树突状细胞(im D C s)吞噬及分泌细胞因子IL-12、IL-10功能的影响。为今后Lactadherin的进一步功能和机制研究提供新的思路,临床开发和应用提供理论依据。 方法: 挤带血中分离得到单核细胞,分离当天加入rhGM-CSF(50 ng/mL)和rhIL-4(10 ng/mL),并按照不同组合加入乳凝集素(10 ng/mL)和阻滞剂,诱导分化成未成熟树突状细胞。具体分组如下:①对照组;②乳凝集素组;③ERK通路阻滞组;④ERK通路阻滞剂+乳凝集素组;⑤p38MAPK通路阻滞组;⑥p38MAPK通路阻滞剂+乳凝集素组;⑦JN K通路阻滞组;⑧JN K通路阻滞剂+乳凝集素组。Westem b lo t法检测 ERK、JNK、p38MAPK蛋白磷酸化程度;Real-time P C R法检测MAPK信号通路下游转录因子c-fos、c-jun mRNA表达量;流式细胞分析术检测未成熟树突状细胞的吞噬功能;ELISA法检测未成熟树突状细胞IL-12和 IL-10的分泌情况。采用SPSS16.0统计学软件对所得资料进行统计学分析,数据以均数士标准差(M ean± SD)表示,结果分析组间差异比较采用t检验。^<005表示差异有统计学意义。 结果: (1)乳凝集素处理后,乳凝集素组较对照组ERK蛋白磷酸化水平升高,p38MAPK蛋白磷酸化水平降低,JN K蛋白的磷酸化水平无明显变化; ERK、p38MAPK、JN K阻滞剂分别能使ERK、p38 MAPK、JN K的磷酸化水平明显降低;乳凝集素处理后,MAPK通路下游核内转录因子c-fos、c-jun m R N A表达量明显升高(P<0.05),ERK、p38 MAPK、JN K通路阻滞后,c-fos、c-jun mRNA表达量均明显降低(P<0.05)。 (2)乳凝集素处理后,乳凝集素组较对照组,未成熟树突状细胞的吞噬能力明显增强(P<0.05); E R K阻滞剂处理后,E R K通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,未成熟树突状细胞的吞噬能力明显降低(P<0.05); p38MAPK阻滞剂处理后,p38 MAPK通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,未成熟树突状细胞的吞噬能力明显增强(P<0.05);JN K阻滞剂处理后,JN K通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,未成熟树突状细胞的吞噬能力无明显变化。 (3)乳凝集素处理后,乳凝集素组较对照组,未成熟树突状细胞IL-12、IL-10的分泌量明显降低(P<0.05),IL-12/IL-10的比值明显升高(P<0.05); E R K阻滞剂处理后,E R K通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,未成熟树突状细胞IL-12、I L-10的分泌量明显升高(P<0.05),IL-12/IL-10的比值明显降低(P<0.05); p38MAPK阻滞剂处理后,p38 M A P K通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,IL-12、IL-10的分泌量明显降低(P<0.05),IL-12/IL-10的比值明显升高(P<0.05);JN K阻滞剂处理后,JN K通路阻滞剂+乳凝集素组较乳凝集素组,未成熟树突状细胞IL-12、I L-10的分泌无明显变化,IL-12/IL-10的比值明显降低(P<0.05)。 结论: (1)乳凝集素能使ERK磷酸化水平明显升高,p38 MAPK磷酸化水平明显降低,且 M APK通路下游转录因子c-fos、c-jun mRNA表达量明显增加,提示乳凝集素能激活ERK通路,抑制p38MAPK通路的活化。 (2)乳凝集素可能通过激活ERK通路和抑制p38MAPK通路的活化上调增强未成熟树突状细胞的吞噬功能。 (3)乳凝集素能通过激活ERK通路和抑制p38MAPK通路的活化,下调未成熟树突状细胞分泌IL-12、IL-10;乳凝集素能通过调节ERK、p38MAPK、JN K通路的活化上调IL-12/IL-10的比值。