变应性接触性皮炎模型中温热对皮炎严重程度及细胞因子表达的影响

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目的:热疗为应用物理方法作用于局部组织器官或周身身以增加温度的的一种治疗方法,温热治疗疾病由来已久,温热疗法按加热面积可以分为局部热疗、区域热疗以及全身热疗。目前热疗的方法也较多,如红外线热疗、微波热疗、磁纳米粒子热疗等。接触性皮炎分为原发刺激性接触性皮炎及变态反应性接触性皮炎(ACD)有研究表明在接触性皮炎中朗格汉斯细胞在抗原提成及激活淋巴细胞中起着关键的作用,致敏可以导致朗格汉斯细胞的成熟和迁移,温热也可以导致朗格汉斯细胞的成熟和迁移。在接触性皮炎的发生过程中,Ⅰ型T细胞免疫反应占主导地位,除Ⅰ型T细胞因子的主导作用外,Ⅱ型T细胞因子在接触性皮炎病理生理过程中也起着尤为重要的作用。IL-4对炎症反应可能起到促进作用。故本研究检测不同温热条件下接触性皮炎的严重程度及重要的细胞因子IL-4的表达。  研究方法:  一、第一部分温热对小鼠接触性皮炎严重程度的影响  1、材料:  8周龄雌性小鼠30只随机分为不加热组,一平方厘米加热、二平方厘米加热、三平方厘米加热及四平方厘米加热组、五平方厘米加热组。  2、方法:  电推子剃除背部鼠毛,电动剃须刀剃除绒毛。根据实验需要称量FITC,配成0.5%溶液,移液枪取用100ul FITC溶液,点状均匀涂抹于小鼠腹部,再将小鼠放置于干燥无垫料的鼠笼。背部完全干燥后将小鼠转移至含垫料鼠笼,并做好标记,之后对后5组进行41度加热。第6天游标卡尺测量小鼠耳部厚度,移液枪取用10ul FITC溶液,点状均匀涂抹于小鼠耳部内侧,同样取10ul点状均匀涂抹于小鼠耳部外侧,涂抹完全后等候片刻待背部液体挥发,再将小鼠放置于鼠笼。第7天.测量记录小鼠耳部厚度。  3、统计学处理:  采用软件进行统计学分析处理。组间两两比较采用单因素方差分析进行检验,检验效能为0.05。  二、第二部分温热对小鼠接触性皮炎血清中细胞因子表达的影响  1、材料:8周龄雌性小鼠15只,随机分为不加热组,一平方厘米加热、五平方厘米加热组,每组5只。  2、方法:电推子剃除背部鼠毛,电动剃须刀剃除绒毛。根据实验需要称量FITC,配成0.5%溶液,移液枪取用100ul FITC溶液,点状均匀涂抹于小鼠背部,再将小鼠放置于干燥无垫料的鼠笼。背部完全干燥后将小鼠转移至含垫料鼠笼,并做好标记,之后对后2组进行41度加热。第6天游标卡尺测量小鼠耳部厚度,移液枪取用10ul FITC溶液,点状均匀涂抹于小鼠耳部内侧,同样取10ul点状均匀涂抹于小鼠耳部,外侧,涂抹完全后等候片刻待腹部液体挥发,再将小鼠放置于鼠笼。第七天,摘除小鼠眼球取血,室温放置三十分钟,四度放置2-3小时,待血清析出后,6000-8000rpm离心5分钟,将血清吸入新的冻存管进行Elisa检测。  3、统计学处理:  采用软件进行统计学分析处理。组间两两比较采用单因素方差分析进行检验,检验效能为0.05。  结果:  一、第一部分温热对小鼠接触性皮炎严重程度的影响  在41度加热条件下,随着加热面积的增加,小鼠耳朵肿胀程度增加,统计结果显示不加热组与五平方厘米面积加热组有统计学差异,一平方厘米面积加热组与五平方厘米面积加热组有统计学差异,其余各组两两之间无统计学差异。  二、第二部分温热对小鼠接触性皮炎血清中细胞因子表达的影响  在41度条件下,不加热与一平方厘米加热比较,无统计学差异;不加热与五平方厘米比较,差异有轻微统计学意义;一平方厘米与五平方厘米比较,差异有轻微统计学意义。  结论:通过我们的实验观察,得出以下结论:温热能增加小鼠接触性皮炎严重程度,且大面积在一定程度上,加热面积大,影响越大。
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