铬(Ⅵ)与谷胱甘肽配合物诱导DNA损伤的电化学与光谱研究

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本论文采用电化学方法,研究了谷胱甘肽(GSH)与Cr(Ⅵ)的相互作用,从其循环伏安(CV)和UV-Vis光谱行为可见:在pH5.6的HAC-NaAC缓冲溶液中,当GSH浓度为K2Cr2O7浓度5倍以上时,Cr(Ⅵ)与GSH相互作用,形成一新的Cr(Ⅴ)中间态化合物GSCrO3-:于+0.21V和+0.36V(vsSCE)处产生一对新的氧化-还原峰:在UV-Vis光谱上于431nm处产生一新的吸收峰,当有Zn2+存在时,该体系的电化学和光谱行为都得到了加强,Zn2+对中间化合物的生成和分解过程中起着双重催化作用。本文进一步运用电化学和光谱动力学方法探讨了GSH与Cr(Ⅵ)的作用机制,探讨了中间态化合物GSCrO3-的形成和不稳定性,为Cr(Ⅵ)与GSH的作用机制的研究提供新的分析方法。 对Cr(Ⅵ)与GSH配合物诱导DNA变性进行了循环伏安(CV)、光谱以及圆二色谱(CD)表征,并运用原子力显微镜(AFM)对该过程进行了可视化研究。在pH5.6的HAC-NaAC缓冲溶液中,DNA于+0.20V和0V处分别出现一对很弱的氧化还原峰,在258nm处有强的UV特征吸收,其CD谱体现B型特征,DNA的AFM图谱呈现出铺展的链状;当往溶液中加入Cr(Ⅵ)和GSH配合物时,电化学响应峰峰电流增强,258nm处UV特征吸收峰增高,并且从DNA的CD谱可以看出:溶液中加入Cr(Ⅵ)和GSH配合物后DNA的结构从B型转变到A型,从AFM图谱可以明显的看到Cr(Ⅵ)与GSH配合物诱导DNA断链的过程。这为Cr(Ⅵ)的致癌机理的研究提供了新的表征方法。 以溴化乙锭(EB)为荧光探针,采用荧光光谱法探讨了Cr(Ⅵ)和GSH配合物与DNA的作用机制,研究了体系的荧光光谱、荧光动力学、DNA热变性曲线及离子强度、H2PO4-的影响。结果表明:在PH=7.4的Hepes缓冲溶液中,Cr(Ⅵ)与GSH配合物能诱导DNA双螺旋结构发生变化,并进一步推测了其中的反应机理。
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