目的：腺样囊性癌(ACC),此外也被成为圆柱瘤,作为一种高度侵袭性的恶性肿瘤,属基底细胞样肿瘤,细胞成分上主要是由上皮细胞和肌上皮细胞排列而成,组织学形态上可分为管状、筛状和实性巢等不同类型,由于其浸润性侵袭生长的生物学特点,虽然生长速度缓慢,但是通常可以危及患者生命。临床上,ACC常见于腭部小涎腺及腮腺,下颌下腺也见累及,舌下腺也可见于报道,且临床中见于舌下腺的肿瘤首先考虑腺样囊性癌。ACC约占唾液腺的恶性肿瘤的15-25%,可发生于任何年龄,但好发年龄为40-60岁,性别间差异并不明显。该肿瘤生长缓慢,患者可长期带瘤生存,临床病程较长,由于此肿瘤成浸润性生长,一般不活动,向表面突出不明显,临床所见肿瘤远小于肿物实际大小,肿物很小时即可累计神经,肿物浸润神经而引起疼痛、麻木等症状,可成为患者就医的主要症状。经积极治疗,如手术、放疗、化疗等,腺样囊性癌患者10年生存率约为29-40%。积极治疗后,大多数涎腺腺样囊性癌死亡病例主要是由复发和远处转移造成的,因此,在腺样囊性癌的诊疗过程中,人们希望探索一种更加有效且副作用较低的新的治疗手段。细胞自噬是目前肿瘤研究的热点方向之一,以细胞质中出现大量的自噬体和自噬溶酶体为主要的镜下表现。Temsirolimus具有抑制免疫细胞增殖的功能和自噬激活作用。自噬是一种细胞内组分(如蛋白质、细胞器等)被细胞内的自噬体捕获然后转运至溶酶体进行降解的一系列过程。自噬可以通过维持能量动态平衡和大分子合成来促进细胞生存,尤其在细胞处于应激或营养匮乏时。研究表明,轻度或者较为缓慢自噬过程有利于复杂环境下细胞的存活,但自噬过程过于剧烈可能会导致细胞的死亡或凋亡,某些抗癌药物通过诱导自噬来增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性也可见报道。自噬已经被认为是一种肿瘤细胞对抗癌药产生耐受的药物作用靶点。Temsirolimus,是一种哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂的前体药物,主要活性代谢物是雷帕霉素,经过前期试验,现已批准用于晚期肾细胞癌的治疗。该药物同样被证实在血液恶性肿瘤和胰腺癌中有应用潜质。本研究通过研究Temsirolimus对于ACC-M细胞的影响,并通过动物实验,探讨自噬通路在ACC发生发展中的作用,同时为Temsirolimus治疗ACC提供理论依据。材料与方法：体外实验部分,培养ACC-M细胞株,通过MTT实验研究Temsirolimus对ACC-M细胞增殖的影响,并确定适宜的药物作用浓度；利用western印迹技术检测自噬相关蛋白LC3和Beclinl在实验组与对照组间的表达差异,以此来反映细胞内自噬表达水平；ACC-M细胞中自噬体的形态及数量是利用透射电镜来观察的,在电镜下可以直接的观测各组细胞内自噬体的形态及数量。体内实验部分,ACC-M细胞株荷瘤鼠模型利用组织块构建法构建,待肿瘤体积增长至适宜大小后,根据是否药物干预,随机分为实验组和对照组,实验组定期腹腔内注射适宜浓度Temsirolimus,对照组注射等量PBS,每次注射前均游标卡尺测量并计算肿物体积,第32天处死所有裸鼠,自噬相关蛋白LC3和Beclinl的表达差异利用免疫组织化学染色法检测。结果：体外实验中,MTT实验结果示Temsirolimus对ACC-M细胞具有明显的生长抑制作用,并呈现出剂量-效应关系；western blot检测发现LC3和Beclinl在实验组细胞中表达水平高于对照组；透射电镜实验中,实验组细胞胞内自噬体及自噬溶酶体数量明显高于对照组。体内实验中,实验组荷瘤鼠肿瘤生长速度明显较对照组慢,且终末肿物体积明显小于对照组；根据免疫组织化学染色结果可以发现,Temsirolimus作用下,自噬相关蛋白LC3和Beclin1表达水平明显高于对照组。结论：本实验研究结果显示,Temsirolimus可以明显抑制ACC-M细胞的增殖；Temsirolimus可明显上调ACC-M细胞中自噬水平；体内实验进一步证实了Temsirolimus可明显抑制荷瘤鼠内肿瘤的生长。因此可以推断Temsirolimus通过诱导自噬的发生,可以抑制腺样囊性癌的发展。