扁平苔藓外周血T细胞免疫功能检测与皮损免疫组化的研究

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目的:扁平苔藓(lichen planus,LP)是多发于 30~60岁的慢性、亚急性、炎症性皮肤病,首先由 Erasmus Wilson于 1869 年报道,在人群中发病率小于 1%,目前发病率有增高趋势,男女发病无差别。典型皮损为紫红色多角形扁平丘疹,可发生于身体任何部位,但四肢多于躯干。本病常伴有口腔粘膜损害,最常见于颊粘膜,溃疡型损害有癌变倾向。LP 组织病理学有特征性改变,可见表皮角化过度,颗粒层及棘细胞层不规则增厚,基底细胞液化变性和真皮浅层以淋巴细胞为主的带状浸润。LP 病因与发病机制一直存在争论,临床上又无特效的治疗方法,给患者身心健康带来影响。目前有报道 LP 是 T 淋巴细胞介导的疾病,其发病与发展可能与外周血 T 淋巴细胞免疫功能相关。 淋巴细胞是一种免疫 T活性细胞,其免疫功能的发挥有赖于多种细胞因子和抗原递呈细胞(如郎格汉斯细胞,Langerhans cells, LC)的相互作用。但有关 T 淋巴细胞与相关细胞因子及 LC 在 LP 发病中的作用未见详细的报道。本实验拟对 LP 患者外周血 T 淋巴细胞免疫功能以及皮损中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 12p40 亚基(IL-12p40)、HLA-DR 和 CD1a 表达情况进行研究,以探讨它们与 LP 发病的相关性及 LP 可能的发病机制,为 LP 的临床治疗提供理论基础。 方法:LP 患者病例来源于 2002 年 6 月~2003 年 6 月 1<WP=4>中 文 摘 要河北医科大学第四医院皮肤科门诊就诊 LP 患者共计35例,均经组织病理确诊为LP,其中男 23例,女 12例,年龄 11~73岁,平均(37.26±16.40)岁;病期 20 天~20 年,平均为(26.40±19.68)个月,所有患者被排除患有其它系统性疾病,且近 3 个月内未曾接受任何免疫治疗。取患者皮损区组织用于常规病理分析,并用免疫组化方法检测皮损中 TNF-α、IL-12p40、HLA-DR、CD1a 的表达水平。选取省三院外科及骨科 20 例外伤手术患者的健康皮肤作为正常对照,对照组患者未患其它疾病,且年龄、性别及取材部位与 LP 患者相匹配;同时随机对其中 21 例患者于清晨空腹抽取外周血液标本 4毫升,应用淋巴细胞转化实验法以测定淋巴细胞转化刺激指数,其中男 13 例,女 8 例,年龄 15~73 岁,平均(35.14±16.43)岁;病期 20 天~14 个月,平均(5.46±3.39)个月。另选取 11 例健康体检者外周血作为对照。对照组与患者组在性别和年龄构成上均相匹配。 详细收集患者的有关临床资料,并应用SPSS11.0 统计软件处理数据。组织病理采用石蜡切片 HE 染色观察;免疫组化采用 SP 法,其结果采用秩和检验;外周血淋巴细胞转化实验采用 MTT 比色法,其结果采用两样本均数比较的 t检验。 结果:1.常规组织病理检查显示:入选的 35 例 LP 患者皮损中均可见到灶状或片状基底细胞液化变性和真皮浅层淋巴细胞带状浸润,其中同时存在表皮角化过度、颗粒层及棘细胞层不规则增厚的有 31 例(89%)。2.免疫组化结果发现:TNF-α为角质形成细胞(keratinocyte, KC)及真皮浅层淋巴细胞胞浆着色;IL-12p40 为 KC 胞浆及胞膜着色; 2<WP=5>中 文 摘 要CD1a 为 LC 胞浆着色;HLA-DR 为 LC 及真皮浅层淋巴细胞胞浆着色,KC 胞膜也可见浅着色。在入选的 LP 患者皮损中 TNF-α、IL-12p40、HLA-DR 的表达水平比正常对照组明显增高,有显著性差异(各层比较P 均<0.01),CD1a的表达水平与正常对照组无明显差异(P>.05),但 LC 树突的数量及长度明显增多及增长,与正常对照组相比有显著性差异(P 均<0.01)。3. 外周血液淋巴细胞转化刺激指数测定结果:所入选的 21例 LP 患者中有 18 例明显低于正常人,2 例接近于正常人,1 例高于正常人,明显低于正常对照组,有显著性差异(P<0.01)。 结论:常规组织病理结果显示表皮角化过度、基底细胞液化变性和真皮浅层淋巴细胞浸润是 LP 典型的组织学特征。淋巴细胞转化实验及免疫组化结果表明 LP 患者外周血T 细胞免疫功能低下以及皮损中 TNFα、IL-12p40、HLA-DR、CD1a 的异常表达可能共同参与了本病的发生,其作用环节可能如下。一:LP 患者外周血免疫功能降低是LP 发病前提。二:TNF-α在 LP 发病中起到了始动、炎症放大以及刺激 LC 迁移的作用。三:LP 皮损内 KC 过度表达的 IL-12p40 是引起 LP 病变的关键因子,巨噬细胞及 NK细胞可能也参与了 LP 病变的免疫反应。四:LC 是 LP 的主要递呈抗原的细胞,KC 不起主要递呈作用。五:根据本实验的结果,结合国内外有关口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)报道,推测 LP 与 OLP 是发生在不同部位的同一疾病。
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