抗菌肽(Antimicrobial peptides, AMPs)是由特定基因编码,普遍存在于自然界的具有抗菌活性的一类小分子短肽,是鱼类、两栖类、哺乳动物等非特异性免疫系统的主要成分之一。其来源广泛、分子量低、抗菌谱广、不易产生耐药性,在医药卫生、食品加工以及农林畜牧等领域具有广泛的应用前景。本试验基于天然抗菌肽及报道过的具有抗菌活性的人工合成杂合抗菌肽,运用生物信息学手段,在此基础上重新设计改造,并尝试通过基因工程的表达手段,获得高效表达的新型抗菌肽。本试验利用生物信息学手段,以天蚕素(Cecropins)、蜂毒素(Melittin)、贻贝抗菌肽(Mytilin)、人类抗菌肽Buforin I等序列为蓝本,设计了7条新型抗菌肽氨基酸序列CMM、CM1、CM2、CM3、CM4、CM5、bufor-J,然后根据毕赤酵母密码子偏爱性设计其编码蛋白的基因序列,通过PCR扩增后分别克隆到pPICZaA和pPIC9表达载体,并在毕赤酵母GS115中进行表达和功能分析。本文获得的主要成果如下：①通过生物信息学手段,改造并设计了7条新型抗菌肽氨基酸序列,对其进行生物信息学的分析表明,发现这些多肽均符合抗菌肽的基本特性；②根据新型抗菌肽的氨基酸序列,选择酵母偏爱的密码子,并通过PCR扩增抗菌肽的目的基因,并将其分别克隆到pPICZaA中,并在毕赤酵母GS115中进行了分泌表达。通过抑菌试验,结果表明各个抗菌多肽在pPICZaA表达系统中不能表达出有活性的抗菌肽。③将几种抗菌多肽基因克隆到pPIC9中,并在毕赤酵母GS115中进行了表达。结果表明,通过pPIC9表达系统得到的抗菌肽具有初步抗单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的活性,但是其表达的稳定性和重复性不好。本研究结果表明通过生物信息学方法设计抗菌多肽具有可行性和合理性,同时也为上述新抗菌多肽的进一步研究奠定了基础。