【摘 要】
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槟榔作为“四大南药”之一,具有杀虫、灭螺、抗抑郁、抗氧化、抗疲劳等药理作用,而今广为嗜好性消费品。在我国,海南省为槟榔原果的主要产地,湖南省为槟榔的主要加工地和消费区域。海南省由于处于热带边缘,日照充足、温度适宜、降水充沛,而天然的大温室正是槟榔滋生霉菌的大本营,同时湖南省属中亚热带季风湿润气候,也经常出现槟榔霉变及槟榔中真菌毒素超标的事件。在保质期内的槟榔霉变、真菌毒素超标不仅给药用槟榔和食用槟
【基金项目】
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海南省重大科技计划项目:ZDKJ2016003； 湖南省科技创新计划项目:2017SK2430；
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槟榔作为“四大南药”之一,具有杀虫、灭螺、抗抑郁、抗氧化、抗疲劳等药理作用,而今广为嗜好性消费品。在我国,海南省为槟榔原果的主要产地,湖南省为槟榔的主要加工地和消费区域。海南省由于处于热带边缘,日照充足、温度适宜、降水充沛,而天然的大温室正是槟榔滋生霉菌的大本营,同时湖南省属中亚热带季风湿润气候,也经常出现槟榔霉变及槟榔中真菌毒素超标的事件。在保质期内的槟榔霉变、真菌毒素超标不仅给药用槟榔和食用槟榔产业都带来了巨大损失,而且给人民的生命健康造成了威胁。因此,本研究以霉变槟榔为研究对象,分析了霉变槟榔上微生物多样性、分离、鉴定了优势霉菌,在此基础上,以秀丽隐杆线虫为模式生物,探究了霉变槟榔上优势霉菌对秀丽隐杆线虫的影响。具体研究结果如下:1.通过宏基因组测序技术分别对2批霉变槟榔样品的微生物多样性进行分析,结果表明菌群相对丰度门水平优势菌群,样品Areca.B17是:放线菌门（Actinobacteria）、子囊菌门（Ascomycota）、变形菌门（Proteobacteria）;样品Areca.W17是:子囊菌门（Ascomycota）、担子菌门（Basidiomycota）、厚壁菌门（Firmicutes）;属水平上的优势菌群,样品Areca.B17是:链霉菌属（Streptomyces）、短杆菌属（Brevibacterium）、青霉属（Penicillium）;样品Areca.W17是:曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）、生丝毕赤酵母属（Hyphopichia）;属水平上的优势菌群,样品Areca.B17:NRRL S-1868（Streptomyces sp,链霉菌属）、NRRL F-5053（Streptomyces sp,链霉菌属）、诺卡菌（Nocardiopsis potens）,样品Areca.W17:伯顿生丝毕赤酵母（Hyphopichia burtonii）、赤曲霉（Aspergillus ruber）、巴西青霉（Penicillium brasilianum）。2.通过宏基因组测序技术对霉变槟榔上霉菌的功能进行注释,结果表明在level 1上:2批次样品中代谢过程注释到的基因数都是最多的,样品Areca.B17在生物体系统中所注释到的基因数最少,样品Areca.W17在环境信息处理中所注释到的基因数最少。在level 2上:以碳水化合物代谢、氨基酸代谢和全局及总览图通路为主,信号分子与互相作用和心血管疾病相对丰度较低。在人类疾病中,注释到癌症、病毒传染病和神经退行性疾病中的信号通路最多。3.从霉变槟榔上分离出9株优势霉菌,以形态学为基础,结合r DNA-ITS分子生物学技术手段,构建物种进化树,对9株优势霉菌进行鉴定。其中菌株X1、X2和X4为枝状枝孢菌（Cladosporium cladosporioides）,菌株X3为Aspergillus tabacinus,菌株X5为黑曲霉（Aspergillus niger）,菌株X6和X7为杂色曲霉（Aspergillus versicolor）,菌株X8为链格孢菌（Alternaria alternata）,菌株X9为聚多曲霉（Aspergillus sydowii）。4.通过干预线虫试验发现:黑曲霉（Aspergillus niger）能让线虫的寿命减少62%,链格孢菌（Alternaria alternata）能让线虫的寿命减少55.2%,两者都能让线虫的半致死天数减少72.2%;黑曲霉（Aspergillus niger）对线虫头部摆动频率的抑制作用显著大于链格孢菌;黑曲霉（Aspergillus niger）和链格孢菌（Alternaria alternata）对线虫的体长有显著抑制作用;热胁迫下,前期黑曲霉（Aspergillus niger）所干预的线虫对热更敏感,后期两者不存在显著性差异。
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