多酶型枯草芽胞杆菌的发酵工艺优化与应用研究

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本研究旨在对枯草芽胞杆菌的发酵工艺进行优化,从而提高其发酵液的酶活。而后通过固态发酵的方法,将其应用到处理豆粕的步骤中,获得了良好的效果。该研究对降低我国饲料行业成本,弥补饲料原料短缺,促进相关畜牧行业发展有着重大的现实意义。本研究以筛选细菌的多酶活性为出发点,从实验室分离和保藏的一批芽胞杆菌中,通过功能筛选的方法分别鉴定了这些芽胞杆菌的不同酶活,选出了一株综合活性最高的枯草芽胞杆菌BME-92,在实验室水平对该芽胞杆菌进行研究,发现其能够分泌五种功能性酶,并且活性很高,这些酶包括蛋白酶,木聚糖酶,甘露聚糖酶,淀粉酶和纤维素酶。根据微生物发酵和培养的特点,设计出一个能够发酵枯草芽胞杆菌的发酵培养基配方(豆粕20g/L,麸皮20g/L,(NH4)2SO41g/L, CaCl26g/L, K2HPO40.3g/L, MnSO4·H2O0.2g/L, MgSO4-7H2O0.2g/L)。应用Plackett-Burman设计和响应面分析法设计相结合的优化方法,对该培养基配方进行了优化,确定了该培养基中影响枯草芽胞杆菌BME-92发酵产酶的主要因子及其最佳配方:豆粕17.3g/L, CaCl24.4g/L, K2HPO40.228g/L。其他影响不大的配方维持原比例。发酵配方确定之后,采用单因素优化的方法对发酵条件进行了优化,确定了最佳发酵条件如下:发酵温度37℃,接种种龄12h,接种量2%,发酵时间48h。发酵培养基优化和发酵条件优化后发酵液的酶活普遍得到了提高,其中蛋白酶的活性从1184.1U/mL提高到1895.6U/mL,提高了60%。将优化后的发酵产物和豆粕混合,通过固态发酵的方式来处理豆粕。处理后的豆粕中营养物质得到了很大的提高,可吸收短肽含量从0.41%提高到5.61%,单糖含量从1.53%提高到6.07%。从实际水平验证了该优化模型的可靠性和该处理方法的可行性。
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