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黄瓜是我国主要栽培蔬菜之一,温室栽培的连续种植方式容易引起连作障碍。对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzonic acid,PHBA)是引起连作障碍的主要自毒物质之一。本实验从连作黄瓜根际土中筛选PHBA降解菌,研究降解菌的生理特性,降解菌对黄瓜抗氧化酶、土壤酶活性的影响,评估其对作物连作的缓解作用。具体研究结果如下,(1)筛选出对PHBA降解能力高的3株菌株。结合生理生化和分子鉴定结果,放线菌GLY-P1和GLY-P2分别被鉴定为Streptomyces griseoruber和Streptomyces canus,细菌GLY-P3被鉴定为Ensifer adhaerens。(2)Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2在32?C、p H10、PHBA初始浓度为0.5g/L条件下降解率最高。在偏碱土壤中,Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2降解率较高。Ensifer adhaerens GLY-P3最适降解条件为温度30?C,p H7,PHBA初始浓度为0.5g/L,氮源为硫酸铵,接种量8%(8×109cfu)。在最优降解条件下,12h内Ensifer adhaerens GLY-P3降解PHBA99.2%。(3)推测Streptomyces griseoruber GLY-P1、Streptomyces canus GLY-P2和Ensifer adhaerens GLY-P3代谢PHBA途径可能为原儿茶酸途径。在32?C、p H7、PHBA初始浓度为0.5g/L条件下,Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2发酵液中原儿茶酸的最大含量分别为3.2mg/L和3.8mg/L。(4)将菌株Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2置于PHBA环境中,体内SOD、CAT、DHAR和APX活性发生明显改变,菌株Ensifer adhaerens GLY-P3处于PHBA环境中,体内SOD、CAT、DHAR和MDHAR活性发生明显改变,说明在响应PHBA胁迫中,SOD、CAT、DHAR和APX在菌株Streptomyces griseoruber GLY-P1和Streptomyces canus GLY-P2起主要作用,SOD、CAT、DHAR和MDHAR在菌株Ensifer adhaerens GLY-P3起主要作用。(5)当在每克土壤中施加220微克PHBA时,黄瓜叶片中H2O2、O2.-、MDA含量和SOD、POD、APX、DHAR活性都明显升高,当土壤中施加GLY-P3时,黄瓜中H2O2、O2.-、MDA含量和SOD、CAT、POD活性都明显降低,表明PHBA对黄瓜造成胁迫作用,GLY-P3缓解了PHBA对黄瓜的胁迫作用。土壤中PHBA的施加,使黄瓜根际土壤磷酸酶、脲酶和蔗糖酶活性都普遍的升高了而过氧化氢酶活性降低。GLY-P3的施加使过氧化氢酶活性明显的升高了,土壤磷酸酶、脲酶和蔗糖酶活性都普遍的降低了,缓解了PHBA对土壤酶活的影响。结果表明Ensifer adhaerens GLY-P3能通过调节黄瓜叶片抗氧化酶、土壤的酶活性,缓解黄瓜的连作障碍。