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支气管哮喘(哮喘)是全球最常见的慢性疾病之一,积极防治哮喘,降低哮喘发病率和死亡率,是全世界医学界所面临的共同课题。1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-(OH)2D3)是体内维生素D3最重要的活性代谢产物,主要通过与维生素D受体(vitaminD receptor,VDR)的结合发挥生物学效应。随着对其研究的深入,目前发现1,25-(OH)2D3除经典的调节体内骨稳态及钙磷代谢平衡的生理功能外,还具有在哮喘治疗中的潜在应用前景。本课题旨在加深对1,25-(OH)2D3参与哮喘发病机制的理解,为扩展其在哮喘治疗中的临床运用提供有价值的理论依据本项研究共分两大部分第一部分维生素D3对哮喘大鼠治疗作用的研究目的:观察维生素D3对哮喘大鼠血清中IgE,IL-4,IL-5的影响,探讨它在哮喘治疗中的作用。方法:30只SD大鼠随机分为3组,正常对照组(A)、哮喘组(B)、维生素D3组(C),每组10只。用卵白蛋白(ovalbumin OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay ELISA)的方法测定各组大鼠血清中IgE,IL-4,IL-5的含量;结果:经维生素D3干预后,大鼠血清IgE,IL-4,IL-5的含量均显著降低,与哮喘组比较差异显著(P<0.05)。结论:维生素D3单独可有效的降低哮喘大鼠血清IgE,IL-4,IL-5的含量。第二部分维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠治疗作用的研究本部分共分三个实验实验一:对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid BALF)的细胞总数及分类的影响目的:观察维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠BALF中细胞计数和分类的影响,从细胞学及病理学方面探讨维生素D3联合地塞米松在哮喘治疗中的可能的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为4组,正常对照组(A)、哮喘组(B)、地塞米松组(C)、维生素D3联合地塞米松组(D),每组10只。用OVA腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型。收集大鼠BALF并行细胞计数及分类,同时取大鼠肺组织行HE染色。结果:与哮喘组比较,两治疗组大鼠BALF细胞总数和嗜酸性粒细胞(Eosinophils EOS)均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与地塞米松组比较,维生素D3联合地塞米松组中BALF细胞总数和EOS进一步降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两治疗组支气管粘膜充血水肿及EOS浸润等病理变化明显减轻,肺泡结构存在,组织形态学上未见破坏,肺泡壁轻度增厚,肺间隔未见明显纤维组织增生,肺内小血管扩张充血,炎症反应轻微。其中联合治疗组病理变化呈进一步减轻。结论:维生素D3联合地塞米松能更有效地能降低哮喘大鼠BALF中细胞总数和EOS水平,抑制哮喘大鼠支气管粘膜充血水肿等炎性反应,有效防止气道上皮的损伤、脱落,这可能与维生素D3对地塞米松抑制哮喘的协同机制有关。实验二对哮喘大鼠血清IgE的影响目的:观察维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠血清IgE的影响,从血清IgE水平探讨维生素D3联合地塞米松在哮喘治疗中的可能的作用机制。方法:分组及制模同第二部分,采用ELISA方法测定各组大鼠血清中IgE含量。结果:两治疗组大鼠血清IgE的含量均显著降低,与哮喘组比较差异显著(P<0.05);其中联合治疗组血清IgE进一步降低,同单用地塞米松组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维生素D3联合地塞米松可有效的降低哮喘大鼠血清中IgE的含量。实验三对哮喘大鼠血清IL-4,IL-5,IL-15的影响。目的:观察维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠血清IL-4,IL-5,IL-15的影响,从细胞因子水平探讨维生素D3联合地塞米松在哮喘治疗中的可能的作用机制。方法:分组及制模同第二部分,采用ELISA方法测定各组大鼠血清中IL-4,IL-5,IL-15含量。结果:两治疗组大鼠血清IL-4,IL-5,IL-15的含量均显著降低,与哮喘组比较差异显著(P<0.05);其中联合组血清中各指标含量进一步降低,与单用地塞米松组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维生素D3联合地塞米松能有效的降低哮喘大鼠血清IL-4,IL-5,IL-15的含量,这可能是与维生素D3能协同地塞米松抑制引起哮喘的各种细胞因子有关。