阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种慢性致死性的神经退行性疾病,多发生在老年人群,但也有早发性AD,与遗传因素有关。其主要病理特征是β-淀粉样蛋白(amyloid-βprotein,Aβ)堆积形成的老年斑和神经纤维状缠结,造成神经元损伤。其中,Aβ的形成与三种分泌酶相关,γ-分泌酶被认为是其限速酶,β-淀粉样前体蛋白(amyloid-βprecursor protein,APP)经过γ-分泌酶剪切生成Aβ40/Aβ42。所以,研究γ-分泌酶的结构对于揭示γ-分泌酶的工作机制和治疗AD药物分子设计具有重要意义。γ-分泌酶是一个具有19次跨膜区域的膜内切割蛋白酶,由四个亚基presenilin(PS),nicastrin(NCT),PEN2和Aph1a在空间极为严密复杂排列组成。本研究中,利用昆虫杆状病毒表达系统、哺乳动物表达系统等成功表达四种组分和全酶复合物。由于膜蛋白疏水性,筛选合适的去垢剂溶解膜组分也是本研究中的重点,经过筛选,选择最佳的去垢剂,进行膜蛋白的提取和纯化。实验结果,得到了纯度较高的nicastrin蛋白,并进行体外去糖基化实验,其他组分和全酶复合物经过分步纯化后含量较低。这些结果为下一步各亚基间相互作用研究,全酶复合物的结构研究奠定了基础。