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本文以小麦中第3组Lea基因TaLea3为研究对象,构建了含有TaLea3基因植物表达载体,用于转化丹参,优化了农杆菌介导的丹参遗传转化体系,获得了转基因丹参植株,并进行了相关的分子生物学鉴定及生理验证,为丹参抗旱品种培育奠定基础,同时也为此技术在其它植物中的应用提供有益的借鉴。通过冻融法将表达载体pBIN438-TaLea3分别转入农杆菌EHA105和GV3103中。
研究了农杆菌介导的丹参遗传体系。实验表明取在MS培养基上培养7~14d的丹参叶片预培养2d后,用农杆菌EHA105菌株菌液浓度为OD600=0.7左右,静置,浸染15~25min后,共培养3d。
通过转化,获得了转基因丹参5株。经PCR验证,Southern杂交及RT-PCR证实TaLea3基因已成功的整合到丹参的基因组中,并获得表达。