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三丁酸甘油酯,作为一类具有抗菌特性的饲料添加剂,具有预防肠道炎症,保护肠道黏膜,减少氧化应激的功效,目前已被大量应用在牲畜饲料中,特别是在禽类和仔猪养殖过程中得到了广泛应用,但在反刍动物的抗炎效果还有待进一步的研究。本试验先以牛源EHEC O157:H7大肠杆菌小鼠腹泻模型为基础,探究三丁酸甘油酯对感染牛源肠出血性大肠杆菌小鼠的防治效果;在此基础上进行哺乳犊牛饲喂试验,探究三丁酸甘油酯对哺乳犊牛生长、血液免疫、氧化指标及肠道微生物的作用。本研究的主要内容和结果如下:（1）建立小鼠肠出血性大肠杆菌腹泻模型:采用完全随机试验的方法,选取SPF级别初体重为（20±1）g的KM雌鼠30只,分成5个小组,每个小组6只;采用600 nm OD紫外线光谱仪对菌液浓度进行检测,用生理盐水稀释后,将菌液调制为:0.4×10~8CFU/mL、0.8×10~8CFU/mL、1.0×10~8CFU/mL、1.6×10~8CFU/mL、2.4×10~8CFU/mL等5个浓度后进行腹腔注射,统计小鼠死亡率和腹泻率,试验结果表明:浓度为1.0×10~8CFU/mL时,腹泻率达到83.33%,死亡率为0,确定此浓度为最适宜的造模剂量。（2）三丁酸甘油酯对肠出血性大肠杆菌腹泻小鼠肠的影响:选取SPF级别初体重为（20±1）g的KM雌鼠120只,将其分成6个小组,分别为空白组、模型组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每个小组20只。在试验期前13 d时分别为空白组和模型组于每日晨饲前灌服生理盐水;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组晨饲前分别灌服以下比例的1.0 g/kg、2.5 g/kg、3.5 g/kg、5.0 g/kg三丁酸甘油酯（三丁酸甘油酯质量/小鼠体重）。到试验第14 d时,各个小组小鼠断粮但不断水8 h,之后空白组采用0.2 mL灭菌生理盐水进行腹腔内注射。模型组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别腹腔注射0.2 mL 1.0×10~8CFU/mL EHEC O157:H7菌液。攻毒之后空白组和模型组于每日晨饲前接着灌服生理盐水,四个试验组于每日晨饲前灌服之前相对应的三丁酸甘油酯直到第28d。在感染后第1天、第7天和14天,随机抽取5只小鼠采样,试验期28天。攻毒后第1～7天,各组平均日增重差异极显著（P＜0.05）,模型组平均日增重下降最大;在攻毒后第8～14天,试验Ⅱ、Ⅲ组腹泻小鼠的平均日增重显著增高（P＜0.05）。在攻毒后第1、7天时,模型组IL-1β显著增高（P＜0.05）,空白组与四个试验组之间变化不大;在攻毒后第1天时,模型组IL-4降低（P＜0.05）,试验Ⅲ组IL-4高于其余三个试验组和空白组;在攻毒后第1、7天时,模型组IL-10降低（P＜0.05）,试验Ⅲ组IL-10高于其余三个试验组和空白组;在攻毒后第1、14天时,模型组TNF-α显著增高（P＜0.05）,而空白组与四个试验组之间变化不大。攻毒后第1、7天时,模型组IgA降低（P＜0.05）,而攻毒后第1天试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组IgA要高于空白组和试验Ⅰ组,在攻毒后第7天试验试验Ⅱ组IgA高于空白组和其余三个试验组;攻毒后第1、7天时,模型组腹泻小鼠的IgG显著显著降低（P＜0.05）,试验Ⅲ组IgG高于其余三个试验组;攻毒后第1、7天时,模型组IgM显著降低（P＜0.05）,而试验Ⅲ组腹泻小鼠的免IgM显著高于其余三个试验组。（3）不同添加水平的三丁酸甘油酯对哺乳犊牛生长性能和血液指标的影响:在试验期间各试验组哺乳犊牛体重差异不显著（P＞0.05）;在试验期第20天时,试验Ⅱ、Ⅲ组哺乳犊牛体高显著高于空白组和试验Ⅰ组（P＜0.05）。试验期的第15天和第30天,试验Ⅲ组的哺乳犊牛血液中MDA水平显著降低（P＜0.05）;试验期的第30天,三个试验组哺乳犊牛血液中GSH含量均显著增高（P＜0.05）;三个试验组哺乳犊牛血液中CAT的含量均显著增高（P＜0.05）。在试验期15天时,试验Ⅱ、Ⅲ组哺乳犊牛TNF-α浓度显著降低（P＜0.05）;在试验期第15、30 d时,试验Ⅱ、Ⅲ组哺乳犊牛IL-4显著增高（P＜0.05）;在试验第30天时,三个试验组哺乳犊IL-10浓度显著增高（P＜0.05）。（4）三丁酸甘油酯对哺乳犊牛粪便微生物多样性的影响:在正式试验阶段第0、10、20、30天的晨饲之前,从4组中选出3只试验牛,刮取30 g的直肠末端粪便样品,进行16 S rRNA的检测。48个样品得到了3155435个的有效基因,获得8520个OTU,分别位于41个门、256个纲、438个目、99个科、981个属和612个种。从第0天到第10天,Chao1、Shannon和Simpson指数的变化并未表现出显著性（P＞0.05）。然而,当时间推移到第20 d时,试验Ⅱ、Ⅲ组Chao1指数明显高于空白组（P＜0.05）,而Shannon和Simpson指数的变化则不太明显（P＞0.05）。第30d时,试验Ⅱ、Ⅲ组Chao1、Shannon、Simpson指数均高于空白组（P＜0.05）。试验刚开始第0天至第10天时,各试验组的优势菌群没有显著差异（P＞0.05）。在第20天,试验Ⅱ、Ⅲ组变形菌门的数量明显增加（P＜0.05）。在第30天,试验Ⅱ、Ⅲ组拟杆菌门的数量也都增加。综上所述:在腹泻小鼠试验中,三丁酸甘油酯可以显著提高腹泻小鼠血清中IgA、IgG和IgM含量;降低IL-1β、TNF-α的浓度;提高了抗炎细胞因子如IL-4、IL-10含量,2.5g/kg～3.5 g/kg三丁酸甘油酯对腹泻小鼠效果最好。在犊牛试验中,三丁酸甘油酯可以显著提高哺乳犊牛免疫球蛋白的浓度,降低促炎因子浓度;降低犊牛体内MDA浓度,调节犊牛血清中GSH-Px和CAT的浓度;可提高菌群a多样性,同时提高拟杆菌门相对丰度,改善肠道内环境,提高免疫力。试验Ⅲ组添加3.5 g/kg三丁酸甘油酯对犊牛的效果最好。