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背景:埋线提升作为近年新兴的微创整形手术,通过在不同层次埋置线材,提拉松弛下垂组织、刺激胶原蛋白再生、修复松弛韧带以达到面部年轻化效果,但单纯埋线术后因瘢痕增生、张力分布不均或张力过高,易造成线痕明显、面部不对称、表情不自然等并发症。而A型肉毒毒素可以使目标肌肉松弛麻痹,张力减小,还具有抗炎、减轻疼痛、减轻瘢痕增生等优点。因此,埋线联合A型肉毒毒素注射,可以增强提升效果,减少并发症。但有回顾性研究发现面部提升有效性和持久性仍不明确,面部提升效果和维持时间主要受所埋线材引起的组织反应和线材降解时间的影响,PPDO线作为最新一代可吸收线,因其良好的组织相容性和生物降解性,被广泛应用于埋线提升。线材埋置体内后引起组织反应,刺激胶原纤维增生,形成纤维包膜,并通过巨噬细胞吞噬降解,但A型肉毒毒素可抑制胶原增生,调控巨噬细胞免疫应答,目前没有两者联合使用相关的组织学研究,本实验拟研究A型肉毒毒素对PPDO线组织反应及降解的影响,为临床应用提供一定的参考。目的:研究A型肉毒毒素对PPDO线组织反应及降解的影响。方法:1、分组:将30只Wistar大鼠背部两侧皮下分别埋入8.0cm的PPDO线,采用自身对照分为两组,在左侧实验组所埋线材两侧选6个注射点,每点距离线材1.0cm,点间间隔2.0cm,每点注射1.0U/0.05ml的A型肉毒素(BA组),在右侧以相同的方法注射同等剂量生理盐水作为对照组(NS组)。2、取材:在术后1天、7天、30天、60天、90天,每组随机选取6只大鼠,用10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔麻醉后,背部剃毛,75%酒精消毒,沿脊柱正中切开背部皮肤,向两边剥离,暴露埋线部位,其中1只大鼠取材,以PPDO线为轴心,用组织剪取以线材为中心(含线材)的组织2.0cm×2.0cm×0.5cm,取下的组织快速固定于10%甲醛固定溶液中,切片时垂直于PPDO线轴线方向。每组剩余的5只大鼠,用同样的方法暴露线材后,钝性分离线体周围组织,仔细剥离,取出线材。取材后大鼠腹腔过量麻醉处死。3、观察:(1)大体观察两组局部皮肤有无红肿、线痕、硬结及线体外露;(2)病理切片HE染色观察各组炎症反应和异物反应,采用Duranti分级标准进行评分;(3)病理切片MASSON染色,在40×10倍镜下测量各组纤维包膜厚度,用ImageJ软件计算胶原容积分数;(4)免疫组化法检测CD68表达,ImageJ软件计量;(5)光学显微镜下观察各组PPDO线的形态,并测量PPDO线的主干直径;(6)断裂强度测量:用“万能材料试验机”测量线的断裂强度。4、计量资料以均数±标准差表示,计数资料以发生率或构成比表示,用SPSS20.0软件进行数据的统计学分析,计量资料数据进行单因素方差分析,等级资料采用非参数秩和检验,发生率或构成比的比较采用x~2检验或确切概率法。P<0.05为有统计学意义。结果:1、大体观察:术后即刻所有大鼠(100%)两侧背部轻度红肿,1天后均消退;5只(16.67%)大鼠背部左侧观察到线痕,7只(23.33%)大鼠背部右侧观察到线痕;2只(6.67%)大鼠背部右侧线体外露;1只(3.33%)大鼠背部左侧观察到硬结;所有大鼠均未观察到瘢痕。两组红肿、线痕、线体外露、硬结等并发症发生率相同(P>0.05)。2、炎症反应:炎症反应评分随时间变化呈下降趋势。组间比较提示:炎症反应分级无组间差异(P>0.05)。时间点比较:BA组第1天炎症反应最剧烈,显著高于第7天、30天、60天、90天(P<0.05),炎症反应分级随时间变化显著性下降,至第60天炎症反应评分与第90天相近(P>0.05)。NS组第1天和第7天炎症反应剧烈,显著高于第90天(P<0.05),第7天、30天、60天炎症反应评分相近(P>0.05)。3、异物反应:组间比较异物反应分级无显著差异(P>0.05)。时间点比较:异物反应在各时间点无明显变化(P>0.05)。4、胶原容积分数:胶原容积分数随时间变化呈上升趋势。组间比较:第30天和第90天BA组胶原容积分数小于NS组(P<0.05),其他时间点胶原容积分数相同(P>0.05)。时间点比较:NS组第1天胶原容积分数低于第7、30、60、90天(P<0.05),胶原容积分数随时间变化呈显著性上升,至第30天胶原容积分数与第60天、90天相近(P>0.05)。BA组胶原容积分数随时间变化趋势同NS组。5、纤维包膜厚度:术后第1天暂未形成包膜,术后7天逐渐形成包膜,术后30天纤维包膜完整,且厚度最大,术后60天、90天包膜厚度逐渐减小。组间比较:术后30天BA组的纤维包膜厚度显著小于NS组(P<0.05),其余时间点BA组纤维包膜厚度与NS组相同(P>0.05)。时间点比较:BA组第7天纤维包膜厚度小于第30、60、90天(P<0.05),纤维包膜厚度随时间显著上升,至第60天纤维包膜厚度与第90天相同(P>0.05)。NA组纤维包膜厚度随时间变化趋势同BA组。6、CD68:两组CD68表达随时间变化逐渐上升,到第90天开始下降。组间比较:BA组与NS组CD68表达无组间差异(P>0.05)。时间点比较:两组CD68表达随时间变化逐渐上升,BA组第1天、第7天CD68表达明显低于第60天(P<0.05),第30、60、90天CD68表达相同(P>0.05)。NS组第1天和第7天CD68表达明显低于第60、90天(P<0.05);第30、60、90天CD68表达相同(P>0.05)。7、PPDO线形态观察:术前PPDO线呈紫色,线体光滑,锯齿均匀分布,锯齿锐利,术后1天、7天紫色变浅,线体仍然光滑,锯齿轻度变钝,术后30天线体呈白色,镜下见表面粗糙,锯齿变短变钝,术后60天线体呈白色,镜下见表面粗糙,锯齿断裂,可见部分碎片,术后90天线体已降解成碎片,无法完整从大鼠体内取出。两组大体观察相同。8、PPDO线主干直径:PPDO线直径随时间变化逐渐减小。组间比较:第1天两组PPDO线直径相同(P>0.05);第7天、第30天、第60天BA组直径显著大于NS组(P<0.05)。时间点比较:PPDO线直径随时间变化逐渐减小,BA组第0天(术前)、第1天、第7天PPDO线直径相同(P>0.05),第7天、30天、60天随时间变化PPDO直径呈显著性下降(P<0.05)。NS组第0天(术前)和第1天、第1天和第7天PPDO线直径相同(P>0.05),第0天(术前)大于第7天,第7天、30天、60天随时间变化PPDO直径呈显著性下降(P<0.05)。9、断裂强度:PPDO线的断裂强度随时间变化不断下降。组间比较:第30天BA组断裂强度明显大于NS组(P<0.05),其他时间段两组断裂强度相同(P>0.05)。时间点比较:BA组第0天(术前)和第1天断裂强度相同(P>0.05),第7天、30天、60天断裂强度呈显著性下降(P<0.05)。NS组断裂强度随时间变化趋势同BA组。结论:1、A型肉毒毒素对PPDO线所致胶原纤维增生、纤维包膜厚度具有抑制作用。2、A型肉毒毒素对PPDO线的降解具有抑制作用。