耐酸性明串珠菌的构建及饲料原料提取物对其耐酸能力的影响

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明串珠菌对宿主健康具有促进作用,但在低酸环境中生长受到很大限制,为使明串珠菌在低酸的环境下保持较高的活菌数以达到摄入后能较好的发挥其益生特性的目的,本项目从叶菜类中初步分离筛选出363株菌落形态为明串珠菌的菌株,对其进行耐酸性生长测试,选出4株存活率较高的菌株;测定4菌株在pH值为3.0的模拟胃液中的生长曲线和存活率、在pH值为6.8的MRS液体培养基中的生长曲线和培养基pH值,得出4菌株的耐酸性大小为:B33<F6<F54<E37对4菌株进行革兰氏染色和16S rRNA基因序列分析,得出B33为肠膜明串珠菌,F6、E37、F54为食窦魏斯氏菌;对肠膜明串珠菌B33进行碳水化合物发酵特性分析,得出肠膜明串珠菌B33可以利用葡萄糖、蔗糖、果糖、海藻糖、甘露糖、D-松二糖、N-乙酰氨基葡萄糖、水杨苷、α-甲基-D-葡萄糖苷、苦杏仁苷、熊果苷、葡萄糖酸、甘露醇等碳水化合物。为进一步了解肠膜明串珠菌B33的耐酸性,将肠膜明串珠菌B33与植物乳杆菌KCTC3104、肠膜明串珠菌B-512F和嗜热链球菌KCTC3658进行耐酸性比较。将4菌株接种在pH值为3.0的模拟胃液和pH值为3.0和6.8的MRS液体培养基中,测定其活菌数、存活率、菌株的生长曲线和培养基pH值的变化。结果表明:肠膜明串珠菌B33的耐酸性显著高于其他乳酸菌,并在pH3.0的MRS培养基中生长良好。为进一步提高肠膜明串珠菌B33的耐酸能力,增强其在动物生产上的应用效果,研究了在pH为2.5的模拟胃液中麦麸、豆粕和玉米提取物对菌株耐酸能力的影响及作用机理。结果表明:玉米、豆粕和麦麸提取物对菌株的耐酸能力都具有保护作用,且浓度为10%时,保护作用最好。进一步的单因子分析表明,葡萄糖对菌株的耐酸能力具有保护作用,并随着浓度的增加而增强,酵母膏对菌株的耐酸能力无影响。
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