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目的 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种复杂的自身免疫病,目前认为RA是由不明抗原介导的免疫反应,导致外周血淋巴细胞活化、炎症细胞浸润滑膜及产生大量炎症介质及自身抗体,以非化脓性增生性滑膜炎为主要病理特点,逐渐导致关节软骨的破坏,最后造成关节功能的障碍,并可伴有关节周围软组织及其它器官的损害。近年研究表明核因子—κ B(nuclear factor-kappaB,NF-κ B)在RA中活化,参与了RA发病的多个环节,并起重要作用,抑制NF-κ B活性为临床治疗各种RA提供了一条新的治疗性干预途径,同时也为筛选新型治疗RA的药物指明了前进方向。盐酸青藤碱(sinomenine,Sin)是传统抗风湿药青风藤的提取物,其抗风湿机制目前尚不十分明确。本研究旨在研究RA患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)NF-κ B活性的改变情况,以及Sin对RA患者PBMC NF-κ B活性的影响,进一步阐明RA发病机制及Sin治疗RA的药物作用分子机制。 方法 本研究选择。选择活动期RA患者,共10例,诊断均符合美国风湿病学院1987年RA的诊断标准。同时健康献血者10例为对照组,与RA组患者相比无性别及年龄构成差异。常规分离外周血单个核细胞(PBMC),RA病人及正常人PBMC各分为对照组;Sin组;PHA组;Sin+PHA组,在37℃,5%CO2孵箱内培养6小时,收集培养细胞,提取核蛋白,ELISA法检测NF-κ B转录因子,酶标仪测吸光度A450nm值。 结果 1.正常人对照组与RA患者对照组PBMC NF-κ B活性有显著差异性。RA患者对照组PBMC NF-κ B活性高于正常人对照组。P<0.001。 2.正常人对照组PBMC与PHA组NF-κB活性有显著差异性。正常人PHA组NF-κ B活性高于对照组。P<0.001; 3.RA患者对照组PBMC与PHA组NF一‘B活性有显著差异性。RA患者PHA组NF一‘B活性高于对照组。P(0.001: 4.正常人对照组与Sin组PBMC NF一‘B活性有显著差异性。正常人对照组与Sin组尸BMC NF一‘B活性低于正常人对照组,不同浓度5 in对NF一‘B活性又抑制作用,呈剂量依赖性,浓度增加,抑制作用增加。P<0 .001 5.正常人PHA组与PHA十Sin组PBMC NF一二B活性比较, Sin对PHA刺激后的NF一‘B活性有抑制作用,有显著差异性。P队十Sin组各浓度组内比较有显著差异性,呈剂量依赖性。P<0.001; 6.RA患者对照组与Sin组PBMC NF一二B活性有显著差异性。RA Sin组PBMC NF一‘B活性低于RA对照组,不同浓度Sin对NF一KB活性有抑制作用,呈剂量依赖性,浓度增加,抑制作用增加。P<0 .001; 7.RA患者PHA组与PHA+Sin组PBMC NF一KB活性比较,Sin对PHA刺激后的NF一‘B活性有抑制作用,有显著差异性,P<0 .001。PHA+Sin组各浓度组内比较有显著差异性,呈剂量依赖性。P<0 .001。 结论(l)正常人体内PBMC存在一定量的NF一二B活化,RA患者体内PBMC NF飞B处于高表达状态。(2)Sin对正常人及RA患者PHA刺激前后PBMC NF一二B活性均有影响,而且呈剂量依赖性。(3) Sin与对PBMCNF一‘BP65蛋白亚基有抑制作用,部分抗风湿作用可能通过此途径实现。