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目的通过油酸(Oleic acid,OA)干预HepG2细胞建立非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型细胞,探讨SIRT3调控NAFLD模型细胞氧化应激的机制及丹酚酸B(Salvianolic acid,Sal B)干预作用。方法将HepG2细胞分为对照组、模型组(OA)及干预组(OA+Sal B)。对照组细胞用完全培养基培养24 h;模型组细胞用含1 mmol/L OA的培养基干预24 h;干预组细胞用含1 mmol/L OA的培养基干预24 h,然后用含Sal B的培养基处理3 h。干预完成后,用油红O染色观察细胞内脂滴聚集情况,检测上清液的相关生化指标,证实建模成功。采用荧光探针试剂盒检测细胞内ROS水平,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)试剂盒测定MDA含量;RT-qPCR和Western Blot检测SIRT3、SOD2的mRNA及蛋白相对表达量;免疫沉淀法(IP)检测Forkhead转录因子O1(Forkhead box O1,FOXO1)的乙酰化水平;运用SIRT3过表达质粒上调SIRT3及SIRT3-siRNA下调SIRT3后再给予Sal B干预,通过荧光显微镜观察筛选最合适的转染比例,再通过Western Blot及IP检测SIRT3与乙酰化FOXO1蛋白的相对表达量。结果与模型组相比Sal B可有效降低OA诱导的NAFLD模型细胞中ALT、AST、TG、TC含量,组间比较有明显差异(F值分别为1240.075、471.989、97.53、39.824,P值均<0.05)。三组细胞间MDA含量具有明显差异(F=336.67,P<0.01),模型组MDA较对照组升高,干预组较模型组明显降低。Sal B可有效减轻NAFLD模型细胞内ROS的蓄积,三组细胞间ROS含量具有明显差异(P<0.01)。三组细胞间SIRT3及SOD2的mRNA表达量具有明显差异(F值分别为884.2、2372.2,P值均<0.05),模型组mRNA量均显著低于对照组,干预组较模型组明显升高。三组细胞间SIRT3及SOD2的蛋白表达量均有明显差异(F值分别为296.9、279.4,P值均<0.05),模型组蛋白均显著低于对照组,干预组较模型组明显升高。三组细胞间乙酰化FOXO1的蛋白表达量有明显差异(F=199.8,P值均<0.01),模型组蛋白显著高于对照组,干预组较模型组明显降低。转染SIRT3过表达质粒可有效增多SIRT3表达,细胞内乙酰化FOXO1表达降低,Sal B干预后SIRT3表达量进一步增多,乙酰化FOXO1表达明显抑制。siRNA转染后SIRT3表达明显减低,乙酰化FOXO1的表达增高,Sal B干预后仅轻微增强SIRT3的表达,对乙酰化FOXO1抑制作用不明显。结论NAFLD模型细胞较正常肝细胞SIRT3及SOD2表达降低,乙酰化FOXO1表达增多,细胞损伤加重,细胞内脂质及过氧化物蓄积增多,Sal B可通过调节SIRT3/FOXO1通路减轻NAFLD模型细胞的脂质蓄积和氧化应激,对NAFLD其起到一定的治疗作用。