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DCE-01是一株“广谱性”、“高效性”脱胶菌，对多种草本纤维原料均能起到很好的脱胶作用，且6.0h能独立完成苎麻脱胶，不需要其他化学方法后处理补充。其脱胶功能的广谱性和高效性在国内外都属于领先地位。本文以DCE-01菌株为研究对象，从DCE-01菌株中克隆出3个关键脱胶酶基因，以2种不同的排列方式将这3个关键脱胶酶基因串联起来，分别在大肠杆菌和DCE-01菌株中表达，获得结果如下: 1.根据全基因组测序注释结果设计特异引物，从DCE-01菌株克隆出关键脱胶酶基因片段3个:果胶酶基因(pelE)、木聚糖酶基因(xyn)及甘露聚糖酶基因(man)。经测序及生物信息学分析:pelE核酸序列长1185bp，编码395个氨基酸，预测蛋白分子量为43.8kDa;xyn核酸序列长1251bp，编码416个氨基酸，预测蛋白分子量45.74kDa;man核酸序列长1137bp，编码378个氨基酸，预测蛋白分子量41.85kDa。 2.通过设计特异引物和PCR扩增获得带有特定限制性酶切位点的关键脱胶酶基因（PelE基因、Xyn基因和Man基因）片段，经酶切并与表达载体pET-28a连接，构建成单基因表达重组子，同时，按照PXM、XPM的顺序串联排列在表达载体pET-28a的MCS区段上，构建成多基因共表达重组子，然后，将单基因表达重组子和多基因共表达重组子导入BL21菌株中，成功构建PelE、Man和Xyn的单基因表达重组菌株(pET-28a-P/BL21、pET-28a-M/BL21和pET-28a-X/BL21)和多基因共表达重组菌株（pET-28a-PXM/BL21和pET-28a-XPM/BL21）。 3.将构建的重组子转入到DCE-01（关键脱胶酶基因来源菌株）中，成功获得单基因同源表达的重组菌株3个，包括pET-28a-P/DCE-01、pET-28a-X/DCE-01、pET-28a-M/DCE-01，多基因同源共表达的重组菌株2个，即pET-28a-PXM/DCE-01（或DCE01PXM）和pET-28a-XPM/DCE-01(或DCE01TM)。 4.对BL21系列重组菌株的酶活测定结果显示:(1)pelE重组菌株所表达PelE酶活为471.97U/mL，而把pelE排列在启动子后面第一位和第二位所形成pET-28a-PXM/BL21和pET-28a-XPM/BL21时，对应的PelE酶活分别是532.68U/mL和121.43U/mL。(2)xyn重组菌株所表达Xyn酶活为44.32U/mL，而把xyn排列在启动子后面第一位和第二位所形成pET-28a-XPM/BL21和pET-28a-PXM/BL21时，对应的Xyn酶活分别是47.43U/mL和31.42U/mL。(3)man重组菌株所表达Man达16882.86U/mL，而将man排在远离启动子位置形成的pET-28a-PXM/BL21与pET-28a-XPM/BL21时，对应的Man酶活分别为645.21U/mL和230.83U/mL。因此，可以推论:(1)用于构建多基因共表达体系的载体的启动子对pelE的表达效果有显著促进作用;(2)构建多基因共表达体系时，目的基因的表达效果与插入位点离启动子的距离呈负相关，即距离越远效果越差;(3)在多基因共表达体系中，man的表达效果受pelE插入位点的影响突出。 5.以DCE-01和DSM18020（模式菌株）为对照，对多基因同源共表达重组菌株纯培养液的酶活测定结果显示:(1)重组菌株DCE01PXM、DCE01XPM的PelE酶活性分别是DCE-01菌株的2.77倍、1.01倍和DSM18020菌株的10.91倍、4.11倍;(2)重组菌株DCE-01PXM、DCE-01TM的Xyn酶活性分别是DCE-01菌株的1.28倍、1.82倍和DSM18020菌株的5.61倍、8.08倍;(3)重组菌株DCE-01PⅪM、DCE-01XPM的Man酶活性分别是DCE-01菌株的1.99倍、1.01倍和DSM18020菌株的6.16倍、3.16倍。由此可以得出结论:采用基因串联方法将来自DCE-01菌株的关键脱胶酶基因(pelE、xyn、man)整合到表达载体(pET-28a)中形成重组子，无论是导入原核表达菌株E.coli BL21(DE3)还是导入DCE-01菌株都获得了成功表达，而且多基因同源共表达重组菌株表达PelE、Xyn、Man的酶活都高于DCE-01菌株。 6.液相色谱分析DCE-01、DSM18020、DCE-01PXM、DCE-01XPM菌株用于苎麻脱胶发酵液的结果表明:DCE-01PXM菌株的发酵液中检测到的单糖含量要明显高于其他几个菌株，DCE-01PXM菌株发酵液中的单糖含量略高于DCE-01菌株，而DCE-01菌株脱胶发酵液的单糖含量要明显高于DSM18020菌株。这一结果与上述酶活检测结果基本一致，说明将DCE-01关键脱胶酶基因按照PXM的顺序串联排列形成重组子后导入DCE-01中进行多基因同源共表达的方法，能在一定程度上提升DCE-01的脱胶功能。