【摘 要】
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【背景和目的】:大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,欧美国家肿瘤死亡原因统计中,大肠癌是仅次于肺癌的第二大原因,在我国已居第4—6位,并呈逐年上升的趋势。过去20年来,结肠
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【背景和目的】:大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,欧美国家肿瘤死亡原因统计中,大肠癌是仅次于肺癌的第二大原因,在我国已居第4—6位,并呈逐年上升的趋势。过去20年来,结肠癌作为消化道最常见的恶性肿瘤之一,在治疗上已取得了一定的进展,以5-氟脲嘧啶（5-FU）为基础的辅助化疗已经有效地降低了淋巴结阳性的结肠癌患者的死亡率,但是由结肠癌耐药引起的复发和转移仍然是进一步提高疗效的主要障碍,因此明确5-FU耐药的机制对于改善和提高结肠癌的治愈率具有重要的意义。5-FU作为一种抗代谢的化疗药物,主要是通过抑制胸苷酸合成酶或者结合到DNA和RNA上来诱导细胞发生调亡的。目前的研究提示5-FU耐药可能是多因素的,包括胸苷酸合成酶的高表达,溴夫定三磷酸酶和甲基MLH1基因的激活,Bcl-2、Bcl-XL和Mcl-1蛋白的过表达等,但是其中确切的耐药机制仍不清楚。在本研究中,我们将用高浓度的5-FU来处理人结肠癌DLD1和DLD1-TRAIL/R细胞,以建立获得性5-FU耐药的结肠癌细胞,并通过分析耐药细胞的生物学特性,以探讨获得性5-FU耐药的可能机制。 【实验方法】:在台盼蓝染色后用血细胞计数器计数存活细胞进行细胞活力测定;通过Western免疫印迹检测各种蛋白表达水平;流式细胞仪检测处理后肿瘤细胞的细胞周期的测定;在得到细胞存活率后用Curve Expert软件计算各种化疗药物的IC50:各处理组间的差异采用配对的t检验来评估。
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