大肠杆菌重组腺苷脱氨酶高表达发酵条件的研究

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本文的研究目的是通过营养、温度、工艺等的改进提高大肠杆菌菌浓并增加腺苷脱氨酶产量。通过温度比较得出结论:37℃比30℃更有利于腺苷脱氨酶生产,复合培养基比合成培养基更有利于腺苷脱氨酶产生,但通常情况下37℃复合培养基中较容易发生菌体早衰,而30℃培养或合成培养基培养却更有利于菌体生长,因此通过降低37℃复合培养基中的前期菌体生长速度,最终不仅使菌浓得到提高,而且最终腺苷脱氨酶的表达量也得到增加,菌体活力得到维持。这对于将来的大规模生产具有重要意义。通过研究生长过程中的细胞含水量变化及RNA含量变化,发现不同的细胞含水量变化趋势对应着不同的菌体生长状态,发酵后期细胞含水量的快速降低与菌体的早衰有关。不同的营养条件下RNA含量不同,变化趋势也不同,营养丰富的复合培养基中RNA含量的最大值高于营养相对匮乏的合成培养基,因此RNA含量可以作为营养的检测指标;另外,在相同营养条件下,培养条件不同时,生长期的RNA的变化趋势与生长速度有关,诱导后RNA的下降幅度可能与菌体生长状况有关,因此通过检测RNA的含量变化可以反映菌体生长状态。
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